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发布时间:2024-07-07 09:48:23

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一般院校,特别是非省会地区的一般院校比较好调剂。另外,B区的院校也比A区的好调剂一些,毕竟是分数线是低十分左右,但是211的就不一定低这些了。这几年,贵阳开通了高铁,分数也是看涨。

网络教育也是国家承认学历,跟自考成考都是一样的,教育部电子注册。远程教育,在教育部已出台的一些文件中,也称现代远程教育为网络教育,是成人教育学历中的一种。是指使用电视及互联网等传播媒体的教学模式,它突破了时空的界线,有别于传统的在校住宿的教学模式。由于不需要到特定地点上课,因此可以随时随地上课。学生亦可以透过电视广播、互联网、辅导专线、课研社、面授(函授)等多种不同管道互助学习。是现代信息技术应用于教育后产生的新概念,即运用网络技术与环境开展的教育。

1、山东大学的几个学院,如山东大学化学学院、山东大学医学院医学微生物学教研室、山东大学材料学院等,都接受调剂2、东北大学的化学专业徐燕课题组可接受调剂,只招3名学生3、中国石油大学(北京)的新能源研究院,招生人数:5人4、南京农业大学的理学院生物物理方向,招生人数:2人5、太原理工大学的智能传感与测控课题组和光学工程、凝聚态物理、集成电路6、海南大学的材料与化工学院和海洋学院硕士研究生

网络教育学历国家承认,社会认可,学信网可查,效力等同于高考统招专科、本科学历,在公务员考试、研究生考试、证书考试、晋升、职称评定等方面都享有统招相同学历的同等待遇。国内:可以用做学历认证,网络教育大专、本科学历是国家承认学历,教育部电子注册,学信网可查,毕业证书获得者的待遇与普通高校同类毕业生相同,都可以参加硕士研究生考试、公务员考试、司法考试等。国际:留学考研,承认我国学历文凭的国家已有20多个,包括学历互认和学分互认。允许持有学历证书或单科合格证书的自考生进入本校直接攻读学位或者免修、减修部分课程。其中英国、法国、德国、新西兰、澳大利亚等国已与我国教育部签订了学历互认协议,承认后并会将自考生与普通高校毕业生同等对待。获得学士学位的我国自考生直接申请研究生课程。【点击测试我提升本科需要多少钱】想要了解更多关于网络教育的相关信息,推荐选择致学教育。致学教育是国内领先的专注于成人学历提升的机构,凭借多年自考、成考辅导经验、超高考试通过率、灵活多样的教学方式,受到了学员的一致好评,是权威、专业的自考远程教育基地。致学教育建立了一站式学习管理服务平台,以服务学员为中心、全面满足学员的学习需求,以帮助考生更好的接受成人高等教育,并使学员顺利通过考试、取得文凭。学员可以根据自身的情况,自由、灵活地选择所需辅导课程。

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简历   1~ 上海交通大学 化学化工学院,副教授,硕士生导师;   4~1 中国石油大学化学化工学院,教师,副教授;   7~4 黑龙江省牡丹江师范学院化学系,教师,讲师;   7~7 东北师范大学化学系,研究生;   9~7 东北师范大学化学系本科生。   研究方向   无机纳米材料的制备   教学改革   1、《实验化学》一类课程建设,校教改项目,9-9, 负责《实验化学一》教学、管理工作   2、无机与分析化学 校精品课程,理论教学、实验教学、教材建设   3、计算机在化学中的应用 校一类课程,参加网站建设   4、实验化学(1-1)考核方法的改革 学校立项,全面的管理工作和具体的实验指导工作   5、《基础化学》教材建设 学校立项,主编   6、《大学化学》 上海市精品课程建设项目,理论教学   出版教材   1、《基础化学》,主编, 化工出版社,2005年;   2、《实验化学(上)》,副主编 , 科学出版社,2003年。获得上海交通大学2005年校优秀教材一等奖   发表的教学论文   1、建设基础化学网站的经验,《大学化学》18,N5(31-34) 2003.9第一作者   2、硫酸亚铁铵制备常规实验与微型实验的比较,《实验室研究与探索》,23,N9,66~67,88,2004,第一作者   3、综合化学实验改革的一种新途径及尝试全国高等化学新实验交流研讨会(论文集)2003.4第三作者   4、关于《基础化学》的编写,新世纪应用化学教学理论与实践(论文集),中国石化出版社10,第一作者   专利   发明专利:制备纳米晶SnO2粉的方法,申请号: 9,公开号: 1569645。发明人:郑茂俊,马荔等   获得的教学表彰/奖励   1、2004年上海交通大学通用电器优秀教师。   研究课题   1、模板法合成新型超高密度垂直磁记录纳米结构材料。上海市科委纳米科技专项基金,(编号:0352nm013)1-12,排名第3。   2、硅基衬底ZnO纳米管阵列的可控制备及光电性能研究。国家自然科学基金(编号:50572064, 1-12,主要成员,排名第2。   其他教学活动   1、毕业论文,共4人,PRP,5人   2、参加组织完成了化工学院第一届实验化学竞赛,负责无机化学和分析化学的全面工作(包括命题、预实验、监考、评分等)。组织化工学院第二届实验化学竞赛。   3、承担关系单位相关专业人员的培训工作。完成了上海第二工业大学学生的“无机化学实验”和“分析化学实验”的全面工作。

一般院校,特别是非省会地区的一般院校比较好调剂。另外,B区的院校也比A区的好调剂一些,毕竟是分数线是低十分左右,但是211的就不一定低这些了。这几年,贵阳开通了高铁,分数也是看涨。

马荔,1985年出生,是广东南方经济卫视tvs1的女主持人。2010年入行,曾经是《今日一线》外景记者,总是冲在新闻最前线,转岗之后,主持过大型生活服务类日播节目《生活闲情》以及2010年南方跨年盛典等大型活动。代表作品有《今日一线》、《南方财经报道》、《生活闲情》。扩展资料:马荔2012年7月31日现年27岁的内地主持在香港婚姻注册署跟现年48岁的雷宇扬注册结婚。凭主演《阴阳路》电影系列而为人熟悉的影星雷宇扬,已退隐娱圈从商,跟未婚妻相距21岁。在的微博上,她自我介绍为“南方经视TVS1《生活闲情》的主持人”参考资料来源::百度百科—马荔

尚德机构虚假宣传,诱导消费,无标准,无纪律,收费因人而异,制造很多不公平,同样的课程有人几千有人几万。学习过程中有什么问题或要求,能再次收费就再次收费,实在收不到了,才会妥协一点。 吃相极其难看,堪比美国。和他们打交道,你会痛苦无比,就两个字,心累。所以,还没有报名的,千万止住你的脚步,换个其它机构吧。报名前说他们的班级考试通过率95%(现实连25%都不到),押题成功率近100%(根本没有押题一说,把考试题型说一下就叫押题?那只要熟悉考研知识点的人都可以说押题成功率100%),绝无二战(睁眼说瞎话),考不过退款(别傻了,还有附加条件的),尚德不倒学到老(要看新课程再交钱,否则只给你看旧课程)。以上括号中的内容,都是你报名后才知道的。本人报了18800考研协议班,尚德承诺考不过退款10000,指望能多享受些服务,实际上有些同学只交了8800,尚德的服务也只有一个,就是网络课程,大家看的都是同一套,而且讲得也不好,某宝上可能几十块就买一套,网络上甚至还有免费的都比他们讲的好。终了,我没考过,他们也1分不退(即使退了10000,他们还赚8800呀),理由是不符合他们的附加条件(看够一定直播),这条件太无耻了,都是上班族,直播不一定有时间看,我平时都看的重播。那些考过了的,也不用感谢尚德,那是因为你自己的努力,你换任何一个机构,哪怕你不报机构,身边有考过的同学,给你指点下看哪些学习资料,你一样能考上。那些考不上的,很多也都认命,因为我们的目的最后还是能考上,所以也都选择妥协,不管怎样继续学习。造就了尚德越来越目无王法。不甘心的人,什么黑猫投诉,315都都试过了,一直等消息也没有下文,或者也处理不了,如果你去请律师,那还要先交律师费,并且他们也不保证能够追回。被坑了的人,还有什么办法吗?如果实在没有,我只能在网络上多发些帖子,提醒一个是一个。

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回答 你好,这个机构是国家承认的呢 尚德机构是真的,因为国家《高等教育自学考试暂行条例》中明确规定" 高等教育自学考试毕业证书获得者的待遇与普通高校同类毕业生相同"毕业证书是有用的,是国家承认的。 高等教育自学考试毕业证书获得者的工资待遇:非在职人员录用后,与普通高等学校同类毕业生相同;在职人员的工资待遇低于普通高等学校同类毕业生的,从获得毕业证书之日起,按普通高等学校同类毕业生工资标准执行。 尚德机构是中国的职业教育机构,成立于2003年3月,致力于提高学员职场竞争力。尚德机构的培训课程和服务范围,从职业资格认证、技能培训,到与职业相关的就业服务,业务覆盖全国多个城市,服务全国学员。尚德机构标准化的课程体系,是尚德机构职业培训的模板。 希望能够帮助到你哦 提问 为何毕业后不发证? 回答 你好,你说一下你的具体情况呢 更多5条 

百度里面多的是呀……以借鉴一下下哟

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回答 你好,这个机构是国家承认的呢 尚德机构是真的,因为国家《高等教育自学考试暂行条例》中明确规定" 高等教育自学考试毕业证书获得者的待遇与普通高校同类毕业生相同"毕业证书是有用的,是国家承认的。 高等教育自学考试毕业证书获得者的工资待遇:非在职人员录用后,与普通高等学校同类毕业生相同;在职人员的工资待遇低于普通高等学校同类毕业生的,从获得毕业证书之日起,按普通高等学校同类毕业生工资标准执行。 尚德机构是中国的职业教育机构,成立于2003年3月,致力于提高学员职场竞争力。尚德机构的培训课程和服务范围,从职业资格认证、技能培训,到与职业相关的就业服务,业务覆盖全国多个城市,服务全国学员。尚德机构标准化的课程体系,是尚德机构职业培训的模板。 希望能够帮助到你哦 提问 为何毕业后不发证? 回答 你好,你说一下你的具体情况呢 更多5条 

你好:总体看是双非学校,地处非热点地区,专业冷门,而且报考上线率比较低的学校。这里须要明确,今年容易调剂不等于明年也容易调剂,是动态边变化的。关于考研调剂的20条忠告:大学四年没有什么突出表现的同学,简单地说就是没有什么资本,奖学金没有或罕有、成绩单上分数拿不出去、没做 过多少课题实验更别说论文了,考研成绩又不怎么样,本科又是非211院校的,这类同学,很难调剂到什么好学校(少数有关系的例外),调剂技巧是锦上添花的东西,巧妇难为无米之炊。请从看到分数的第一时间作出判断,有没有可能进复试,判断不了的请直接打招办电话问。只要没有100%的把握进入复试,请立刻着手调剂。不要在那里傻等分数线,天真地认为调剂大战是从出了分数线材开始。大错特错了。绝大部分院校在分数线出来之前对本校的招生情况、上线情况内部都能估计到八九不离十,但分数线出来之前,作为校方不可能公开本校是否缺额,虽然招生院校心里大致有底。在分数线出来之前联系调剂,不是让招办的人给你个肯定或否定的回答,而是给招办的人留下印象,知道有你这么个人需要调剂,并且有意向调剂到他们学校,等一旦有名额了,让招办的人首先能想到你。 请不要眉毛胡子一把抓地到处乱联系,对于分数不错,大学期间有点资本的同学,调剂是有底线的,太垃圾的院校不要联系,不值得一个优秀的你过去,不要浪费时 间。至于什么样的学校叫垃圾,自己去想,自己心里要有底线。对于没什么资本考得又不好的同学,建议尽早联系能联系到的一切院校,但要求不要太高。 请在调剂时划定重点关注的院校范围,简单地说就是可能有空子可钻的院校。对于有点资本的同学,请重点关注你所报考的院校(看有没有校内调剂的可能)和 你的母校(母校一般不会嫌弃自己的学生,只要有名额) 中西部地区的还不错的学校,比如 兰州大学、西北农林科技大学、西北工业大学等等。 关注一下典型文科名校里的理科专业和典型理科院校里的文科专业,极有可能招不满,比如中国人民大学的理科。 请关注中科院系统里最近几年新办的研究所(如天津工业微生物所,苏州纳米所等)、中西部地区的研究所(如新疆理化所、西双版纳植物园、合肥物质科学研究 院)及中科院研究生院本部(在北京,但报考时通常被忽略,大部分人都只想着研究所了),这些地方有缺额的可能性极大。请关注非中科院系统的研究所,这 类所往往待遇非常好,留下工作的可能性极大(如属于中国医药集团总公司的四川抗菌素工业研究所)。对于条件一般的考生,我只能告诉你们农林类院校师范类院 校接收调剂生的可能性极大。 请在调剂时放宽你的专业。只要与你报考的专业相关就可以,没必要完全一样,这样可以增大你选择的余地。如化学工程专业的考生调剂时可以考虑应用化学、生物化工、环境、制药、材料等甚至一些理科专业。 请不要再问我怎么找研究生院的联系方式,这种问题对于迫切要调剂的你来说太可怕了。对于调剂重点关注院校,请直接上人家学校研招网去找。 简历是一定要做的,建议采用表格的形式,可以把大学期间的成绩单、获奖证书、四六级等一切能证明你很优秀的材料的扫描版本放在简历的后面。简历内容要全 (要有考研成绩一栏),但不能罗嗦,没有人愿意去看一份全是字又乱七八糟的简历。请不要让我提供现成的模板,一个准研究生没有理由做不好简历,自己去想。 发邮件时邮件正文可以是你的调剂自荐信,内容一定要简洁,(万万不能把懊悔自己发挥失常、抱怨老师阅卷不公之类的话写上去,这是最愚蠢的做法,因为结果就 是结果没有人会相信会同情你发挥失常)。自荐信内容大致包括:简单的自我介绍,考研成绩(可用表格形式列出)这个成绩不能达到所报考的院校的要求 可以简单地用一句话表扬一下你的目标调剂院校 表明你调剂的愿望 不要用“希望”这个词,请改成“恳请”。 拒绝提供自荐信的模板,原因同上。 对于重点关注的调剂院校,可以在发邮件前先打个电话过去,让人家知道你想调剂,并把具体个人情况用邮件发送了,有些院校要求提供纸板的材料,那请你特快专递过去,不要怕花钱。 打电话时不要在意接电话老师的态度,招办老师一天要接很多电话,态度不好也是人之常情,理解万岁。 接电话的老师通常会给出3种回答,(1) 我们学校从不接受调剂生,今年也一样,没有名额。(2) 可能有空缺,请你等网站上除通知。(3) 明确告诉你有空缺,找你索要简历。第一种情况,个人以为希望不大,实在想试的话,走导师路线,直接跟导师联系,争取凭你的优秀征服里面某个导师,让他出面 去跟研究生院协商。第二种及第三种情况,跟踪该学校,隔几天联系一次, 不断强化招办老师对你的印象,一有名额就能想到你,也可以走导师路线。走导师路线的时候请注意,不要同时联系同一学校同一专业的多个导师,一个拒了你之后再联系另一个,脚踩两只船最可能的结果是两只船都翻。 打算走导师路线就不要管预备联系的导师是不是缺人,直接联系,但最好是邮件联系,导师一般都有每天看邮件的习惯,不要没有预约地打电话,像个不速之客,很 不好。如果该导师已有人选,他会直接告诉你,这时候,请换一个导师继续联系。如果他正好缺人,你就请你继续套近乎。调剂选择跟那个导师联系时,请不要一味选牛的、有头衔当官的。搞定导师关键是 1 你的专业、学术背景要是他需要的 2 自身硬件条件要好,让导师看了不忍放弃。 第一条是最重要的。请你站在导师的角度想,他的这些研究项目可不可能需要你这样背景的学生。 建议找那跟你专业最近的。 在调剂的情况下一般来说更倾向于考虑最可能的,而不是最好的。就好像博物馆失火,只能抢救一幅画,不是去救最名贵的,而是选择离出口最近的,因为这是最可 能实现的。不要只联系在各种网站上公布了缺额信息的学校,这种公开了缺额的学校地球人都知道联系,竞争压力太大。很多学校根本不公开缺额信息,你必须主动联系它们。心态放好一点,耐心一点。99%的调剂考生都会被拒无数,各种被拒了不要放弃,继续联系,只要你是优秀的就一定能有地方接收。调剂系统开放时,请随时关注上面的动态。但不要轻易地填志愿,因为很多院校的调剂系统是为指定的某几个 人(事先联系过,并已经收到该院校复试通知甚至已经复试完了的人)开放的,你填了也白填,且志愿填报后48小时内不能更改,不要因此而错过最适合你的院 校。建议填之前跟院校先联系,最好是拿到复试通知后再填。你有可能拿到多所学校的复试通知,只要时间不冲突,你可以去多个学校复试。但复试结果并不一定是同时出 来。建议是,不要轻易地答应不是你最最想去的院校的拟录取通知,更不要轻易在研招网上确认这类拟录取通知(因为这不是你最最想调剂的院校),这时候,请你 想尽一切办法跟那个给了你录取通知的学校拖,直到你最最想去的学校出来复试结果,这时候再决定去哪个学校,再网上完成确认操作。

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题目作者(单位)摘要: 关键词: 正文结束语

你好:总体看是双非学校,地处非热点地区,专业冷门,而且报考上线率比较低的学校。这里须要明确,今年容易调剂不等于明年也容易调剂,是动态边变化的。关于考研调剂的20条忠告:大学四年没有什么突出表现的同学,简单地说就是没有什么资本,奖学金没有或罕有、成绩单上分数拿不出去、没做 过多少课题实验更别说论文了,考研成绩又不怎么样,本科又是非211院校的,这类同学,很难调剂到什么好学校(少数有关系的例外),调剂技巧是锦上添花的东西,巧妇难为无米之炊。请从看到分数的第一时间作出判断,有没有可能进复试,判断不了的请直接打招办电话问。只要没有100%的把握进入复试,请立刻着手调剂。不要在那里傻等分数线,天真地认为调剂大战是从出了分数线材开始。大错特错了。绝大部分院校在分数线出来之前对本校的招生情况、上线情况内部都能估计到八九不离十,但分数线出来之前,作为校方不可能公开本校是否缺额,虽然招生院校心里大致有底。在分数线出来之前联系调剂,不是让招办的人给你个肯定或否定的回答,而是给招办的人留下印象,知道有你这么个人需要调剂,并且有意向调剂到他们学校,等一旦有名额了,让招办的人首先能想到你。 请不要眉毛胡子一把抓地到处乱联系,对于分数不错,大学期间有点资本的同学,调剂是有底线的,太垃圾的院校不要联系,不值得一个优秀的你过去,不要浪费时 间。至于什么样的学校叫垃圾,自己去想,自己心里要有底线。对于没什么资本考得又不好的同学,建议尽早联系能联系到的一切院校,但要求不要太高。 请在调剂时划定重点关注的院校范围,简单地说就是可能有空子可钻的院校。对于有点资本的同学,请重点关注你所报考的院校(看有没有校内调剂的可能)和 你的母校(母校一般不会嫌弃自己的学生,只要有名额) 中西部地区的还不错的学校,比如 兰州大学、西北农林科技大学、西北工业大学等等。 关注一下典型文科名校里的理科专业和典型理科院校里的文科专业,极有可能招不满,比如中国人民大学的理科。 请关注中科院系统里最近几年新办的研究所(如天津工业微生物所,苏州纳米所等)、中西部地区的研究所(如新疆理化所、西双版纳植物园、合肥物质科学研究 院)及中科院研究生院本部(在北京,但报考时通常被忽略,大部分人都只想着研究所了),这些地方有缺额的可能性极大。请关注非中科院系统的研究所,这 类所往往待遇非常好,留下工作的可能性极大(如属于中国医药集团总公司的四川抗菌素工业研究所)。对于条件一般的考生,我只能告诉你们农林类院校师范类院 校接收调剂生的可能性极大。 请在调剂时放宽你的专业。只要与你报考的专业相关就可以,没必要完全一样,这样可以增大你选择的余地。如化学工程专业的考生调剂时可以考虑应用化学、生物化工、环境、制药、材料等甚至一些理科专业。 请不要再问我怎么找研究生院的联系方式,这种问题对于迫切要调剂的你来说太可怕了。对于调剂重点关注院校,请直接上人家学校研招网去找。 简历是一定要做的,建议采用表格的形式,可以把大学期间的成绩单、获奖证书、四六级等一切能证明你很优秀的材料的扫描版本放在简历的后面。简历内容要全 (要有考研成绩一栏),但不能罗嗦,没有人愿意去看一份全是字又乱七八糟的简历。请不要让我提供现成的模板,一个准研究生没有理由做不好简历,自己去想。 发邮件时邮件正文可以是你的调剂自荐信,内容一定要简洁,(万万不能把懊悔自己发挥失常、抱怨老师阅卷不公之类的话写上去,这是最愚蠢的做法,因为结果就 是结果没有人会相信会同情你发挥失常)。自荐信内容大致包括:简单的自我介绍,考研成绩(可用表格形式列出)这个成绩不能达到所报考的院校的要求 可以简单地用一句话表扬一下你的目标调剂院校 表明你调剂的愿望 不要用“希望”这个词,请改成“恳请”。 拒绝提供自荐信的模板,原因同上。 对于重点关注的调剂院校,可以在发邮件前先打个电话过去,让人家知道你想调剂,并把具体个人情况用邮件发送了,有些院校要求提供纸板的材料,那请你特快专递过去,不要怕花钱。 打电话时不要在意接电话老师的态度,招办老师一天要接很多电话,态度不好也是人之常情,理解万岁。 接电话的老师通常会给出3种回答,(1) 我们学校从不接受调剂生,今年也一样,没有名额。(2) 可能有空缺,请你等网站上除通知。(3) 明确告诉你有空缺,找你索要简历。第一种情况,个人以为希望不大,实在想试的话,走导师路线,直接跟导师联系,争取凭你的优秀征服里面某个导师,让他出面 去跟研究生院协商。第二种及第三种情况,跟踪该学校,隔几天联系一次, 不断强化招办老师对你的印象,一有名额就能想到你,也可以走导师路线。走导师路线的时候请注意,不要同时联系同一学校同一专业的多个导师,一个拒了你之后再联系另一个,脚踩两只船最可能的结果是两只船都翻。 打算走导师路线就不要管预备联系的导师是不是缺人,直接联系,但最好是邮件联系,导师一般都有每天看邮件的习惯,不要没有预约地打电话,像个不速之客,很 不好。如果该导师已有人选,他会直接告诉你,这时候,请换一个导师继续联系。如果他正好缺人,你就请你继续套近乎。调剂选择跟那个导师联系时,请不要一味选牛的、有头衔当官的。搞定导师关键是 1 你的专业、学术背景要是他需要的 2 自身硬件条件要好,让导师看了不忍放弃。 第一条是最重要的。请你站在导师的角度想,他的这些研究项目可不可能需要你这样背景的学生。 建议找那跟你专业最近的。 在调剂的情况下一般来说更倾向于考虑最可能的,而不是最好的。就好像博物馆失火,只能抢救一幅画,不是去救最名贵的,而是选择离出口最近的,因为这是最可 能实现的。不要只联系在各种网站上公布了缺额信息的学校,这种公开了缺额的学校地球人都知道联系,竞争压力太大。很多学校根本不公开缺额信息,你必须主动联系它们。心态放好一点,耐心一点。99%的调剂考生都会被拒无数,各种被拒了不要放弃,继续联系,只要你是优秀的就一定能有地方接收。调剂系统开放时,请随时关注上面的动态。但不要轻易地填志愿,因为很多院校的调剂系统是为指定的某几个 人(事先联系过,并已经收到该院校复试通知甚至已经复试完了的人)开放的,你填了也白填,且志愿填报后48小时内不能更改,不要因此而错过最适合你的院 校。建议填之前跟院校先联系,最好是拿到复试通知后再填。你有可能拿到多所学校的复试通知,只要时间不冲突,你可以去多个学校复试。但复试结果并不一定是同时出 来。建议是,不要轻易地答应不是你最最想去的院校的拟录取通知,更不要轻易在研招网上确认这类拟录取通知(因为这不是你最最想调剂的院校),这时候,请你 想尽一切办法跟那个给了你录取通知的学校拖,直到你最最想去的学校出来复试结果,这时候再决定去哪个学校,再网上完成确认操作。

【关键词】 蛋白质组 【关键词】 线粒体;蛋白质组 0引言 线粒体拥有自己的DNA(mtDNA),可以进行转录、翻译和蛋白质合成 根据人类的基因图谱,估计大约有1000~2000种线粒体蛋白,大约有600多种已经被鉴定出来 线粒体蛋白质只有2%是线粒体自己合成的,98%的线粒体蛋白质是由细胞核编码、细胞质核糖体合成后运往线粒体的,线粒体是真核细胞非常重要的细胞器,在细胞的整个生命活动中起着非常关键的作用 线粒体的蛋白质参与机体许多生理、病理过程,如ATP的合成、脂肪酸代谢、三羧酸循环、电子传递和氧化磷酸化过程 线粒体蛋白质结构与功能的改变与人类许多疾病相关,如退行性疾病、心脏病、衰老和癌症 尤其是在神经退行性疾病方面,线粒体蛋白质的研究日益受到关注 蛋白质组研究技术的产生与发展为线粒体蛋白质组的研究提供了有力的支持,使得从整体上研究线粒体蛋白质组在生理、病理过程中的变化成为可能 1线粒体的结构、功能与人类疾病 线粒体一般呈粒状或杆状,也可呈环形、哑铃形或其他形状,其主要化学成分是蛋白质和脂类 线粒体由内外两层膜封闭,包括外膜、内膜、膜间隙和基质四个部分 线粒体在细胞内的分布一般是不均匀的,根据细胞代谢的需要,线粒体可在细胞质中运动、变形和分裂增殖 线粒体是细胞进行呼吸的主要场所,在细胞代谢旺盛的需能部位比较集中,其主要功能是进行氧化磷酸化,合成ATP,为细胞生命活动提供直接能量 催化三羧酸循环、氨基酸代谢、脂肪酸分解、电子传递、能量转换、DNA复制和RNA合成等过程所需要的一百多种酶和辅酶都分布在线粒体中 这些酶和辅酶的主要功能是参加三羧酸循环中的氧化反应、电子传递和能量转换 线粒体具有独立的遗传体系,能够进行DNA复制、转录和蛋白质翻译 线粒体不仅为细胞提供能量,而且还与细胞中氧自由基的生成、细胞凋亡、细胞的信号转导、细胞内离子的跨膜转运及电解质稳态平衡的调控等有关 许多实验证实,线粒体功能改变与细胞凋亡〔1〕、衰老〔2〕、肿瘤〔3,4〕的发生密切相关;另外,有许多人类疾病的发生与线粒体功能缺陷相关,如线粒体肌病和脑肌病、线粒体眼病,老年性痴呆、帕金森病、2型糖尿病、心肌病及衰老等,有人统称为线粒体疾病〔5〕 2线粒体蛋白质组学研究现状 1线粒体蛋白质组的蛋白质鉴定Rabilloud等〔6〕在1998年,以健康人的胎盘作为组织来源,分离提取线粒体进行蛋白质组研究,试图建立线粒体蛋白质组的数据库,为研究遗传性或获得性线粒体功能障碍时线粒体蛋白质的变化提供依据 他们使用IPG(pH 0~0)双相电泳技术, 共获得1500个蛋白点 通过MALDITOFMS和PMF等技术鉴定其中的一些蛋白点,鉴于当时基因组信息的局限性,只有46种蛋白被鉴定出来 随着人类基因组图谱的完成,应该有更多的蛋白点被鉴定出来 Fountoulakis等〔7〕从大鼠的肝脏中分离线粒体,并分别利用宽范围和窄范围pH梯度IPG对线粒体蛋白质进行双相电泳,通过MALDIMS鉴定出192个基因产物,大约70%的基因产物是具有广谱催化能力的酶,其中8个基因产物首次被检测到并且由一个点构成,而大多数蛋白质都是由多个点构成,平均10~15个点对应于一个基因产物 Mootha等〔8〕从小鼠大脑、心脏、肾脏、肝脏中分离提取线粒体蛋白质,进行线粒体蛋白质组研究,他们参照已有的基因信息共鉴定出591个线粒体蛋白质,其中新发现了163个蛋白质与线粒体有关 这些蛋白质的表达与RNA丰度的检测在很大程度上是一致的 不同组织的RNA表达图谱揭示出线粒体基因在功能、调节机制方面形成的网络 对这些蛋白与基因的整合分析使人们对哺乳动物生物起源的认识更加深入,对理解人类疾病也具有参考价值 2线粒体亚组分的研究线粒体对维持细胞的体内平衡起着关键作用,因此加速了人们对线粒体亚组分的研究 线粒体内膜不仅包含有呼吸链复合物,它还包含多种离子通道和转运蛋白 对线粒体发挥正常的功能起着重要作用 Cruz等〔9〕专注于线粒体内膜蛋白质的研究,他们通过二维液相色谱串联质谱技术鉴定出182个蛋白质,pI(9~5),MW(Mr 6000~527 000),这些蛋白与许多生化过程相关,比如电子传递、蛋白质运输、蛋白质合成、脂类代谢和离子运输 3线粒体蛋白质复合物的研究线粒体内膜上嵌有很多蛋白质复合物,对于线粒体的功能具有重要作用,应用常规的双相电泳很难将这些蛋白质复合物完整地分离出来 Devreese等〔10〕采用Bluenative polyacrylamide gel electrophoresis(BNPAGE)分离线粒体内膜上的五个氧化磷酸化复合物,结合肽质量指纹图谱,成功地鉴定出氧化磷酸化复合物中60%的已知蛋白质 BNPAGE在分离蛋白质复合物时可以保持它们的完整性,因此这项技术可以用于研究在不同的生理病理状态下蛋白质复合物的变化及临床诊断等 4线粒体蛋白质组数据库目前人们查询最多的线粒体蛋白质组数据库有MITOP, MitoP2和SWISSPROT三种 MITOP〔11〕是有关线粒体、核编码的基因和相应的线粒体蛋白质的综合性数据库,收录了1150种线粒体相关的基因和对应的蛋白质,人们可依据基因、蛋白质、同源性、通道与代谢、人类疾病分类查询相关的信息MitoP2〔12〕数据库中主要为核编码的线粒体蛋白质组的数据,MitoP2数据库将不同来源的线粒体蛋白质的信息整合在一起,人们可以根据不同的参数进行查询 MitoP2数据库既包括最新的数据也包括最初的MITOP〔11〕数据库中的数据 目前数据库中主要为酵母和人的线粒体蛋白质组的数据,以后还将收录小鼠、线虫等的数据 数据库旨在为人们提供线粒体蛋白质的综合性数据 SWISSPROT数据库包含269种人类线粒体蛋白质,其中与人类疾病相关的蛋白质有225种 数据库中有相当一部分蛋白质没有明确的定位和功能信息的描述 随着线粒体研究热潮到来和蛋白质组学技术的发展,将有更多的数据被填充到数据库中 3线粒体蛋白质组研究中存在的问题 1线粒体碱性蛋白质与低分子量蛋白质线粒体蛋白质中,具有碱性等电点的蛋白质占有很大比例,在等电聚焦时难以溶解,一些碱性程度很大的蛋白质如细胞色素C(pH 3)在pH 3~10的IPG胶上不能被分离出 线粒体蛋白质中相当一部分蛋白是低分子量蛋白,因此在SDSPAGE电泳时要分别应用高浓度和低浓度分离胶,以更好地分离低分子量蛋白质和高分子量蛋白质 2线粒体膜蛋白质线粒体是一个具有双层膜结构的细胞器,内膜和外膜上整和有很多膜蛋白质,这些膜蛋白质对于线粒体功能的发挥具有重要作用,但是膜蛋白质具有很强的疏水性,在等电聚焦时,用常规的水化液难以溶解,因此用常规的IPG胶检测不出来 换用不同的裂解液对膜蛋白的溶解具有帮助 有研究人员在等电聚焦缓冲液中加入SB310以增加膜蛋白的溶解性 在等电聚焦前对样品进行有机酸处理也可以增加膜蛋白的溶解性 在研究中人们发现,不同的样品应该选用不同的裂解液,没有一种裂解液能够适合于所有的膜蛋白质百事通针对膜蛋白质的难溶和等电聚焦时的沉淀,一些研究人员另辟径,避开双相电泳而进行一维SDSPAGE电泳,如Taylor等〔13〕先通过蔗糖梯度离心将线粒体蛋白质分成不同的组分,而后将每一个组分进行一维电泳,一维电泳中SDS可以很好地溶解疏水性蛋白质和膜整合蛋白质,他们鉴定出600多种线粒体蛋白质,其中有很多蛋白质以前应用双相电泳没有被鉴定出来 他们鉴定的蛋白质中有很多具有跨膜结构域,如adenine nucleotide translocator(ANT1)和VDACs蛋白质,这些蛋白质对于调节线粒体的功能具有关键作用而且应用常规双相电泳很难被鉴定出来 提高质谱鉴定的灵敏性对于一维SDSPAGE电泳后蛋白质分析鉴定具有很大的帮助,Pflieger等〔14〕应用液相色谱串联质谱(LCMS/MS)成功地鉴定出179种线粒体蛋白质,其中43%是膜蛋白质而且23%具有跨膜结构域 液相色谱串联质谱(LCMS/MS)检测灵敏度较高,SDS可以很好地溶解膜蛋白,因此这种方法比传统的双相电泳具有更高的灵敏性而且不受蛋白质等电点、分子量、疏水性的限制 3线粒体样品的纯度线粒体样品的纯度对于蛋白质组分析非常重要,在样品制备的过程中,具有与线粒体相同沉降系数的成分会同线粒体一起沉降下来,如内质网、微粒体、胞浆蛋白的一些成分 这些蛋白斑点出现在双相电泳胶上,会影响整体蛋白质组分析的结果 因此提高样品的纯度至关重要 Scheffler等〔15〕采用多步percoll/metrizamide密度梯度离心纯化线粒体样品,双相电泳后鉴定出61个蛋白质,几乎全部是线粒体蛋白质 4未来展望 随着人类基因组工作草图的完成,生命科学的研究进入后基因组时代,蛋白质组学的研究遂成为重点 蛋白质组学旨在采用全方位、高通量的技术路线,确认生物体全部蛋白质的表达和功能模式,从一个机体、一个器官组织或一个细胞的蛋白质整体活动来揭示生命规律,并研究疾病的发生机制、建立疾病的早期诊断和防治方法 抗体技术在线粒体蛋白质组学领域中具有重要的应用价值 单克隆抗体还具有高度的特异性,应用于亲和层析技术中不仅可以去除组织细胞样品中高表达的蛋白质成分,同样也可以富集表达量极低的组分 结合蛋白免疫转印、流式细胞术和免疫组织细胞化学,实现对相应蛋白质的定性、定量和细胞(内)定位分析 与微阵列技术(芯片)结合,可以研制出含有成百上千种抗体的蛋白(抗体)芯片,这种新技术使得研究人员可以在一次实验中比较生物样品中成百上千的蛋白质的相对丰度,能够检测到样品中浓度很低的抗原,以实现蛋白质组学对复杂组分高通量、高效率的检测 某些抗体可以特异性识别蛋白质翻译后修饰的糖基化或磷酸化位点、降解产物、功能状态和构象变化,成为基因芯片检测不可替代的补充 抗体捕获组分的分析有助于蛋白质复合物及其相互作用的研究,也在新的蛋白质发现和确认方面提供重要信息和证据 随着抗体技术的不断提高,抗体数目的不断增多,蛋白质组学的研究也将更加深入 线粒体不仅参与细胞重要的生命活动,而且对于生物进化的研究也有重要意义 随着线粒体研究热潮的到来,将有更多的蛋白质被发现,对于蛋白质功能的研究也将更加深入,相信线粒体蛋白质组的研究对于人类疾病的发病机制和早期诊断将做出重要贡献 【参考文献】 〔1〕 Jiang X, Wang X Cytochrome Cmediated apoptosis 〔J〕 Annu Rev Biochem, 2004,73: 87- 〔2〕 Chen XJ, Wang X, Kaufman BA, et Aconitase couples metabolic regulation to mitochondrial DNA maintenance 〔J〕 Science, 2005,307(5710): 714- 〔3〕 Petros JA, Baumann AK, RuizPesini E, et mtDNA mutations increase tumorigenicity in prostate cancer 〔J〕 PNAS, 2005,102(3):719- 〔4〕 Wonsey DR, Zeller KI, Dang CV The cMyc target gene PRDX3 is required for mitochondrial homeostasis and neoplastic transformation 〔J〕 PNAS, 2002, 99(10): 6649- 〔5〕 Taylor RW, Turnbull DM Mitochondrial 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