关于病毒的科学论文怎么写高中生物

病毒（Virus)由一种核酸分子（DNA或RNA）与蛋白质（Protein）构成或仅由蛋白质构成（如朊病毒）。病毒个体微小，结构简单。病毒没有细胞结构，由于没有实现新陈代谢所必需的基本系统，所以病毒自身不能复制。但是当它接触到宿主细胞时，便脱去蛋白质外套，它的核酸（基因）侵入宿主细胞内，借助后者的复制系统，按照病毒基因的指令复制新的病毒。目前，科学界公认的对病毒的定义是只能在活着的宿主细胞内复制的感染源。有一些病毒能诱发良性肿瘤，如痘病毒科的兔纤维瘤病毒、人传染性软疣病毒和乳多泡病毒科的乳头瘤病毒；另有一些能诱发恶性肿瘤，按其核酸种类可分为DNA肿瘤病毒和RNA肿瘤病毒。DNA肿瘤病毒包括乳多泡病毒料的SV40和多瘤病毒，以及腺病毒科和疱疹病毒科的某些成员，从肿瘤细胞中可查出病毒核酸或其片段和病毒编码的蛋白，但一般没有完整的病毒粒。RNA肿瘤病毒均属反录病毒科，包括鸡和小鼠的白血病和肉瘤病毒，从肿瘤细胞中可查到病毒粒。这两类病毒均能在体外转化细胞。在人类肿瘤中，已证明EB病毒与伯基特淋巴瘤和鼻咽癌有密切关系；从一种T细胞白血病查到反录病毒。此外，Ⅱ型疱疹病毒可能与宫颈癌病因有关，乙型肝炎病毒可能与肝癌病因有关。但是，病毒大概不是唯一的病因，环境和遗传因素可能起协同作用。病毒感染常发生在感冒等上呼吸道感染后，病毒颗粒可由血循环直接进入内耳血循环中，引起耳蜗毛细胞、神经节细胞及微血管等结构的破坏。病毒亦可经圆窗侵入内耳，引起迷路炎等病损，引起耳聋。

病毒的定义病毒是一类比较原始的、有生命特征的、能够自我复制和严格细胞内寄生的非细胞生物。病毒的特点（1）形体微小，具有比较原始的生命形态和生命特征，缺乏细胞结构；　　（2）只含一种核酸，DNA或RNA；　　（3）依靠自身的核酸进行复制，DNA或RNA含有复制、装配子代病毒所必须的遗传信息；　　（4）缺乏完整的酶和能量系统；　　（5）严格的细胞内寄生，任何病毒都不能离开寄主细胞独立复制和增殖。病毒的基本类型名称基本特征（真）病毒至少含有蛋白质和核酸两类物质亚病毒类病毒含有具有单独侵染性的核糖核酸（RNA）分子拟病毒只含有不具备侵染性的RNA 朊病毒没有核酸而有感染性的蛋白质颗粒病毒的增殖过程从单个病毒吸附开始至所有病毒释放，此过程称为感染周期或复制周期。一个感染细胞一般释放的病毒数为100-1000。整个周期分成以下六个过程：（1）吸附：吸附是决定感染成功与否的关键环节。病毒吸附于敏感细胞需要病毒表面特异性的吸附蛋白与细胞表面受体相互作用。（2）侵入：病毒通过以下不同的方式进入宿主细胞：注射式侵入（有尾式噬菌体常用）、细胞内吞（动物病毒常用）、膜融合（具有包膜的病毒常用）以及其它特殊的侵入方式。（3）脱壳：脱壳是指病毒感染性核酸从衣壳内释放出来的过程。有包膜病毒脱壳包括脱包膜和脱衣壳两个步骤，无包膜病毒只需脱衣壳，方式随不同病毒而异。注射式侵入的噬菌体和某些直接侵入的病毒可以直接在细胞膜或细胞壁表面同步完成侵入和脱壳。病毒粒子以内吞方式或直接进入细胞后，经蛋白酶的降解，先后脱去包膜和衣壳。以膜融合方式侵入的病毒，其包膜在与细胞膜融合时即已脱掉，核衣壳被移至脱壳部位并在酶的作用下进一步脱壳，病毒核酸游离并进至细胞的一定部位进行生物合成。病毒脱壳必须有酶的参与，脱壳酶来自宿主细胞，有的为病毒基因编码。（4）生物合成：病毒借助宿主细胞提供的原料、能量和场所合成核酸和蛋白质，期间所需的多数酶也来自宿主细胞。（5）装配：病毒的结构成分核酸与蛋白质分别合成后，在细胞核内或细胞质内组装成核衣壳。绝大多数DNA病毒在细胞核内组装，RNA病毒与痘病毒类则在细胞质内组装。（6）释放：绝大多数无包膜病毒释放时被感染的细胞崩解，释放出病毒颗粒，宿主细胞膜破坏，细胞迅即死亡。绝大多数有包膜病毒通过细胞内的内质网、空泡，或包上细胞核膜或细胞膜以出芽方式释放而成为成熟病毒，在一段时间内逐个释出，对细胞膜破坏轻，宿主细胞死亡慢。病毒的起源学说关于病毒的起源学说主要有三种：（1）退化性起源学说。退化性起源学说认为病毒是细胞内寄生物的退化形式。这种细胞内寄生的产生原因可能是由于微生物对某种不能穿过细胞膜的代谢发生了严重依赖。在细胞内，这类寄生物可以在不影响其生存的情况下逐渐丢失部分生物学功能。它们所必需保留的功能是具有可进行自主复制的DNA复制原点（顺式元件）、可以对复制进行调控的反式调控蛋白，以及能与宿主生物合成及复制系统相互作用的顺式和反式功能。最终的选择结构，就可产生一种专性细胞内寄生的DNA分子或质粒。　　退化性起源学说可以把病毒的起源解释为两个阶段：首先，寄生物在细胞内产生独立复制的DNA质粒，然后，编码寄生物亚细胞结构单位的基因发生突变，形成病毒的衣壳蛋白。随着进化的发生，新获得的可在细胞间转移的特性被进一步选择下来。（2）病毒起源于宿主细胞中的RNA和（或）DNA成分的学说。这种学说认为，病毒是正常的细胞组分在进化过程中获得了自主复制的能力独立进化而来的。该学说能解释所有病毒的起源：DNA病毒起源于质粒或转移因子；反转录病毒起源于反转座子；RNA病毒起源于自主复制的mRNA。（3）病毒起源于具有自主复制功能的原始大分子的学说，即病毒起源于自主复制的RNA分子。核糖核酸多聚体具有自主复制的信息和能力。由于发现RNA分子具有催化化学反应的能力使得RNA为生命和病毒的起源的学说变得更具有吸引力。小而简单的RNA分子具有至少下列三种化学功能：1）核糖核酸酶的活性；2）能自我拼接去掉内部的核酸序列（核酸）；3）有实验表明，以RNA作引物可以合成依赖于模板的多聚胞嘧啶核酸。也就是说，RNA分子可以进行复制和进化相关的三个基本反应。病毒的保藏方法病毒保藏在病毒研究中是一个很重要的环节，不论是病毒的基础研究，还是应用研究都与病毒的保藏都有着紧密的联系。　　病毒保藏的原则：（1）低温条件下保藏，温度愈低愈好；　　（2）根据不同的病毒种类，采用不同的病毒保藏方法；　　（3）在特定的保藏条件下（温度、方法），经过一段时间保藏之后，一定要进行活化增殖，同时测定病毒活力大小，再入库保藏；　　（4）在保藏过程中应尽量减少不必要的传代，严格按规范操作，避免毒种相互交叉感染，使病毒不产生变异，保持病毒的遗传稳定性；　　（5）必需开展保藏相关技术的研究，对各类病毒的最佳保藏条件进行摸索，为毒种保藏提供科学依据。　　病毒保藏的方法：　　（1）冰箱保藏法。普通冰箱保藏：4—8℃；低温冰箱保藏：-20℃—-40℃；超低温冰箱保藏：-85℃。特点：方便、价格相对较便宜。此法保存要注意停电和冰箱的故障。　　（2）液氮保藏方法：-196℃。设备：液氮发生器。　　（3）冷冻真空干燥保藏法（冻干法）。又称低压冻干法和冰冻干燥法，先将液态的样品冻结成固态，在真空条件下使温度下降，通过直接升华抽去水分，从而使物质脱水干燥，简称冻干法。特点：冻干法保藏是在低温，干燥和隔绝空气的条件下，使病毒处于休眠状态，它的代谢是相对静止的，因而使病毒可以保存较长的时间。以上材料摘引自“中国科普博览”（）网站中的“病毒馆”部分

2010年，我已经是交警大队的总队长啦！一个普通而又具特殊意义的清晨，我走进值班室，打开监控系统，立体交叉的交通线路马上展现在我的面前，由我设计的黄线网络醒目漂亮，它以优质的服务和超常的功能迅速赢得了市民的喜爱…… 可别小看这黄色交通线，它可是一种神奇的线。它会发出悦耳动听的音乐声，会像最优秀最有经验的交警一样辨别每辆车的违规情况，它也会像最公正的法官那样对违规车辆毫不留情…… 8点10分，监控系统发出警报，只见屏幕上出现一辆可能是醉酒的司机开的车，摇摇晃晃。两旁的黄色交通线通过气味感应器感受到酒后驾车的情况，马上变得通体透明，并不停地闪烁，同时传出迷人的劝阻音乐，音乐之后，黄色的交通线立即用优美的声音提醒这位司机：“对不起，您酒后驾车，违反交通规则，请立即停车。”可是这位司机把黄色交通线的警告当成耳旁风，脚踩油门想直冲过去，这时会说话的黄色交通线立即发出强大的磁性，把汽车牢牢吸住。机器人警察走过去，轻轻一提，就把违规的汽车和司机送到空中专用线路，让他到交警队接受批评和培训。 9时15分，一辆满载客人的客车，从东向西疾驰而来，黄色线的数量感应器立即发出清脆的声音：“对不起，您的车超载10人，请立即停车。”司机一听黄色交通线知道得这么清楚，只好乖乖地停下了车。机器人交警又迅即找来另一辆客车，将超载的客人送上了车。黄色交通线在交通线路上大展神威，有了它，我这个交警总队长可轻松多了，交通事故已经成了历史，过马路已经成为人们工作之余的一种享受……

向日葵为什么向阳生长我是个爱看书的女孩，从书中我时常看到有关向日葵的资料。它们告诉我向日葵这种植物总是朝着有太阳的地方生长。我心中百思不得其解，我不明白为什么向日葵向阳生长呢？这其中又蕴含着什么奥秘呢？于是，我开始了对向日葵的调查。从资料中，我知道了向日葵朝阳的这个特点是因为它的花盘下面的茎部含有一种奇妙的植物生长素。一遇光线照射，生长素就会转移到背光的一面去并且刺激背光一面的细胞迅速增殖，于是，背光一面就比向光一面生长得快，使向日葵产生了向光性弯曲。为了增加资料的真实性，我针对向日葵的这个特点进行了实验。首先，我准备了2盆向日葵。第一盆，我将它放在朝阳的一面，让其自由生长。第二盆，我将它放在背光的一面。然后得出结论。这个实验的结果是:第一盆向日葵生长发育良好，第二盆向日葵转向了朝阳的一面，生长较好。通过这次实验，我知道了向日葵是一种喜热又耐寒的植物。不论何时何地它能够坚强的生长。

关于病毒的科学论文怎么写高中生

微生物无处不在。它们通常不被我们的肉眼所见，但却富含在空气、土壤、水中、我们的皮肤、头发上、口腔和肠道里。它们使土壤肥沃，使环境清洁。它们改变着我们的食物。其中有些能保护我们免受有害微生物的侵犯。然而，大多数人几乎意识不到它们的存在，除非他们生了病。人们通常认为微生物是肮脏的、不受欢迎的东西，因为它们中有少数会让人生病，比如会致人感冒的细菌和病毒等等；有些会使食物发霉变质。然而，相当多的微生物和人类是互利共生的，如我们平时吃的菇类有很多就是真菌类，很多微生物的次级代谢产物都可以提供给人类作为治疗药物，比如青霉素，头孢菌素等都是它们的产物。另外，工业迅猛发展的同时也给人们带来了一定的环境污染。在众多的污水、废水处理方法中，利用微生物好氧降解的生物学的处理方法因具有经济方便、效果好的突出优点而被广泛应用。总的来说，微生物把一个迷人的微小生物世界呈现在我们面前。这些微生物联合起来可以完成地球上生命所能实现的全部过程。对我们的生活和周围环境带来深远的影响。

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关于病毒的论文题目怎么写高中生物

不可以，题问抗原性是由SARS病毒((结构))中的什么体现的，强调结构，而抗原决定簇并非病毒结构而是有一个特定结构的位点或集团，因此必须回答衣壳。

生物分为细胞生物和非细胞生物，病毒没有细胞结构，但因为它只能寄生在活细胞中，称为非细胞生物。病毒由核酸和蛋白质外壳组成。病毒分为两种，DNA病毒和RNA病毒。DNA病毒包括T2噬菌体，RNA病毒包括烟草花叶病毒和艾滋病病毒等等。病毒的增值利用宿主细胞中的物质作为原料，包括吸附，注入，合成，组装和释放

你说的是什么病毒呢？是软件类的计算机病毒还是生物感染的病毒

关于病毒的科学论文怎么写高中

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你好，计算机病毒的预防和诊断的毕业论文随着Internet的迅速发展我国的互联网用户不断的增加，成为仅次于美国的国家，位居世界第二。互联网的发展也使得计算机病毒开始渗透到信息社会的各个领域，给计算机网络系统带来了巨大的破坏和潜在的威胁。为了确保信息的安全与畅通，研究计算机病毒的防范措施已迫在眉睫。计算机病毒的防治目前主要有主动防御技术和启发式病毒扫描技术等，也在朝着一些新的趋势发展。【目前主要有主动防御技术和启发式病毒扫描技术等。本文将从计算机的特点入手，来探讨对付计算机病毒维护计算机网络安全的方法和措施。欢迎来电脑管家企业平台访问

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病毒的科学小论文怎么写高中生物

科技小论文　　——警惕全球变暖　　最近这几年，大家觉得天气一下子就变热了，原本凉爽的秋天现在几乎要到10月下旬才开始，8月份最热的天居然达到了40度以上。这是为什么呢？原来，是人类自己惹的祸。　　随着人类高科技发展进程越来越快，科学随之产生的副作用逐渐体现出来，全球变暖就是一个例子。天气炎热，在酷暑里泡空调成为了一项新的“业余爱好”，但人们可曾想过，空调会带来什么负面影响呢？答案当然是肯定的，空调排放的气体中含有大量的甲烷，输送到外面，甲烷也是导致全球变暖的气体。同时，空调还会浪费掉许多电，所以要尽量避免用空调，适当即可。　　而另一个原因就是：二氧化碳！汽车尾气与工厂废气中含有大量二氧化碳，而二氧化碳最可能导致温室效应（即全球变暖）现在汽车逐渐增多，据有关方面统计，到21世纪，汽车在全世界已有7亿辆，大量的尾气严重影响着我们，咳嗽，喉咙发炎……最重要的是全球变暖。有人统计，美国人均二氧化碳排放量已达到了20吨一年！中国每年的二氧化碳排放量人均排放量也有51吨一年！我们周围的环境在恶劣地变化。　　更重要的原因就是：森林锐减，水资源破坏，生态链严重被破坏，大量土地贫瘠，水污染严重，据统计全世界10%的河水被污染，新鲜的淡水供应成了问题，同时由于矿物质被大量使用，燃烧出的CO2气体导致了大气污染，同时臭氧层被严重破环，南北极出现臭氧层洞，加剧了环境的恶化。这样恶性循环的话，最终会导致人们的生活被严重影响。　　这样一来的悲剧是什么呢？当然是显而易见了！天气加热，海平面上涨，南北极冰川融化，海滨城市，岛国被淹。这一切，都严重影响了人类的生存，实验证明，以后300年，海平面将上涨半米多，这还是最乐观的数据。再过7年，全球变暖将会无可逆转地持续。更可怕的是，由于北极冰融化，降雨量加强，大量淡水汇入北大西洋，破坏了墨西哥暖流，一旦墨西哥暖流被切断后，欧洲西北部温度将会下降5—8度之多，从而造成的影响，很可能引发新的冰河时期！想必大家一定看过《后天》这部电影，剧中的情景正是几百年后对我们地球的一个真实写照：龙卷风，冰层断裂，温度急剧下降，冰风暴，冻雨，地震，洪水，海啸……这并不是疯狂的幻想，如果人类不停止毁坏环境的话，这将成为现实！全球变暖不仅仅是天气变热，更会牵连出许多负面影响！　　为了拯救地球，我们应该尽量做到：不开空调，使用回收环保纸张，舍弃肉类（牛排）食品（牛消化中含有一氧化二氮，如果你转为素食主义者，每年二氧化碳的排放量将减少5吨！）不用塑料袋，乘公交车……生活中的点点滴滴。其实环保并不难，只要你支持环保，就是你给这个星球的最好礼物，不需要太多言辞，只要每个人都行动起来，就会是一股强大的力量！如今，日本，英国，美国等国家纷纷行动起来，我们虽然也采取了行动，但，对于一个有13亿人口的泱泱大国，这一点，还是不够的。　　所以，警惕全球变暖，是全人类为了挽救地球的唯一方法，有人也许会说：我们不是可以移居到别的星球上去吗？答案虽是肯定的，但那又能容纳多少人呢？有人说：治理温室效应的资金太大了，对金融来说是天价。但，如果一直拖延，最终的结果，是我们的地球面目全非，别说金融，就连自己的生命也难保啊！所以环境保护不应只停留在口头上，而要真正付之与行动了。

双休科学作业：联系生活实际，写一篇以蔬菜保鲜为话题的科学小论文科技小论文一般包括：题目署名正文正文部分至少三段。第一段：提出自己要探究（或困惑）的问题，并说明为什么要探究。第二段：用具体事例说明自己是如何探究解决这个问题的过程方法：或亲自动手实验，或询问家长，或查阅资料……把过程写下来。第三段：总结，主要回答研究出了什么和你的感受。

【综述】几种用于发现未知病毒核酸序列的技术及其应用翁康生病毒是引发人类传染性疾病的主要病原体之一，它们极大地威胁着人类健康。目前还存在人类尚未认知或新出现的病毒，随时可能严重危害人类健康安全〔1 - 3〕。及早地发现，鉴别未知的或新出现的病毒，是有效的预防和控制的先决条件之一。因此，建立、储备、改良、发展、乃至创新应用于发现、鉴别未知或新出现病毒的技术方法是十分必要的。近20 多年来，常采用传统的微生物学技术方法和现代分子生物学技术方法相结合的途径，发现和鉴别未知病毒。通过细胞培养的方法分离病毒、电镜观察、用已知病毒的抗血清建立的免疫学方法作排他性检测、用已知病毒核酸序列建立的PCR、杂交等方法，作特异核酸序列的检测、用分子生物学技术获得未知病毒核酸序列，查询基因数据库，检出并确定未知病毒基因组序列，最终发现鉴别出未知病毒。对于无法用细胞分离培养的未知病毒，有的采用免疫学与分子生物学技术相结合，筛选获取病毒特异抗原编码基因的克隆，进而发现鉴别出该病毒。更多的则是采用相应的分子生物学技术，从被检样品中发现获取未知病毒的核酸序列，进而发现鉴别未知病毒。无论未知病毒是否可以用细胞培养分离，最终对其基因组序列的测定分析，是鉴别和判断的决定性依据之一，而获取未知病毒的核酸序列是前提条件。从少量样品中，从高度复杂的宿主细胞核酸物质中，分离、扩增、获取足够量的无基因序列资料的未知病毒的核酸片段，供进一步克隆、测序、生物信息学分析，是用分子生物学技术发现、鉴别未知和新出现病毒的关键之一〔4〕，也是最终测定分析，拼接出未知和新出现病毒基因组序列的瓶颈步骤。病毒所携核酸物质有DNA 和RNA 之分，可采用的技术方法也有所不同，现将有关技术与其应用作一简介，以供参考。1 代表性差异分析法代表性差异分析法是为寻找分析两个生物样品复杂的基因组间有何差异而发展建立起来的分子生物学技术方法，并不断得到演化，发展和应用。病毒感染宿主细胞后，与未感染的同类细胞相比，二者核酸物质间的差异主要在于是否存在病毒核酸。消减去二者核酸间相同序列的背景部分，扩增、比较、选取余下可能存在差异的部分，进一步分析以发现未知病毒的核酸序列。病毒的核酸结构各有不同，可选用相应的代表性差异分析法，见表1 。111 DNA 代表性差异分析法(DNA Representation differenceanalysis ， DNA RDA)此方法是Lisitsyn 等〔5〕利用核酸消减杂交技术〔6〕、PCR 方法和双链DNA 热变性后互补链退火复性的二级动力学原理〔7 - 8〕作者单位:上海市疾病预防控制中心 200336表1 病毒核酸类型与各代表性差异分析法的选用病毒核酸类型DNA RDA c DNA RDA非rRNA 序列6 核苷酸引导c DNA RDAds DNA 线状√ds DNA 环状√ss RNA polyA( + ) √ss RNA polyA( - ) 3 √ds RNA polyA( - ) √ 3 负链ss RNA polyA( - ) 视病毒在宿主细胞的转录机制而定。而建立的。方法中将需分析的样品DNA(Test DNA ，T- DNA) 和对照DNA(Driver DNA ，D - DNA) 设为二组，分别用同一种限制性内切酶酶切处理，并接上5′端去磷酸化的人工接头，补齐接头后，加入与接头序列互补的引物作PCR 扩增。切除扩增产物上的人工接头后，切出的T - DNA 连上第二种人工接头，变性后与过量的变性D - DNA 杂交。通过杂交，消减去T- DNA 中与D - DNA 中同源的核酸序列，而只存在于T - DNA 中的靶序列DNA(Target DNA) 则自我退火复性，其两端连有第二种人工接头。加入与第二种接头互补的引物作PCR ，只有靶序列DNA呈指数扩增，因而得到进一步富集。进过如此重复的几个轮回后，以电泳检测比较T- DNA 和D - DNA ，将T- DNA 中呈现的差异部分作分离，克隆，序列分析。Lisitsyn 等以10μg 人淋巴细胞基因组DNA 作为D - DNA ，在相同的人DNA 中加入相当于单拷贝量的120 pg 腺病毒DNA作T- DNA。以此作为实验模型，用DNA 代表性差异分析法成功的寻找、鉴定出外加入的腺病毒DNA 序列。应用此技术，Chang 等〔9〕在艾滋病相关的卡波西肉瘤(Kaposis Sarcoma) 中发现一段类似人类疱疹病毒的基因，并由此发现一种新的病毒HPV8。以后人们又以此技术发现鉴定了HPV6、TTV 病毒、黄热病毒样基因组、MDV 等〔10 - 13〕DNA 病毒。112 cDNA 代表性差异分析法(cDNA Representation differenceanalysis ， cDNA RDA)Hubank 等〔14〕针对mRNA 所含序列相对简单的特点，提出了cDNA 代表性差异分析法。它的基本原理与DNA RDA 相同，主要不同在于，采用识别4 核苷酸序列的限制性内切酶，它的识别位点在mRNA 反转录成的cDNA 中出现的频率更高，平均酶切片段长度约256 bp ，保证了cDNA 序列群中绝大多数序列，至少被切出一个片段可扩增，供差异分析，分离鉴定。cDNA RDA 技术相对经济，可高效灵敏地用于非常少的起始材料而获得结果〔15〕。具有polyA( + ) - RNA 病毒，其核酸可类似于mRNA 分离纯化，因此可应用此技术。利用cDNA RDA技术，发现鉴定了TiV、MenV ，等〔16 ，17〕RNA 病毒。113 非rRNA 序列6 聚核苷酸引导反转录的cDNA RDA中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med ， June 2007 ， Vol18 No13 ·317 ·© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing H All rights ( - ) - RNA 病毒，其核酸物质不似于mRNA ，需和宿主细胞总RNA 同时分离，并用随机引物作反转录。因为宿主细胞总RNA 中rRNA 约占80 % ，由于竞争反应、靶序列信号被湮灭等原因，从这样的总RNA 抽提物中，用随机6 聚核苷酸引物引导反转录的cDNA RDA 技术，发现鉴别polyA( - ) - RNA 病毒核酸序列是困难的。Endoh 等〔18〕罗列了6 聚核苷酸所有可能的排列组合，共计4 096 个序列模式，以大鼠18S、518S、28S 等rRNA、微卫星重复序列、SARS - CoV、BI - 3 病毒等的序列数据为模型，筛选出在rRNA 序列中出现频率极低或不出现的6 聚核苷酸序列模式共96 种。将这些序列分别合成并混合后，称之为非rRNA 序列6 聚核苷酸引物。生物信息学分析96 种序列模式在哺乳动物病毒科具代表性的1 791 个病毒基因组序列中出现的频率，数据表明，非rRNA 序列6 核苷酸引物可引导绝大多数病毒的cDNA 合成。分别用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物和随机6 核苷酸引物作cDNA 反转录效率、cDNA RDA 试验，结果表明，二类引物对人工合成的RNA (二类引物在其序列中出现的频率相似) 反转录效率几乎相等，而前者对细胞总RNA反转录效率远低于随机引物。用二类引物作cDNA RDA ，检测人工合成的RNA ，前者灵敏度是用随机引物的30 倍。在模拟实验中用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物引导反转录，串联cDNARDA 技术，检测鉴别出感染细胞的BI - 3 和SRAS - Cov 核酸序列片段。此方法能从1μg 总RNA 中检测出3 ng 的外来RNA ，其检测灵敏度不及普通的PCR 检测方法，但对于检测鉴别在宿主细胞中复制，但不知其基因序列的poly A( - ) - RNA 病毒而言，也是一个可选择的方法。114 抑制消减杂交cDNA RDA 技术结合消减杂交和PCR 抑制作用〔19〕的技术原理，Diatchenks 等〔20〕等发展出了抑制消减杂交技术( suppressionsubtractive hybridization ，SSH) 。与前两种RDA 技术不同点在于，SSH 技术将内切酶酶切处理的T - cDNA 分为两份，分别接上不同序列的去磷酸化的接头1 和2 ，分别于过量的D - cDNA作第一轮杂交。杂交过程中两组中的单链T - cDNA 浓度趋同，T- cDNA 中的非靶序列单链cDNA 与D - cDNA 中相应序列形成杂交双链而被消减， T - cDNA 中差异表达的单链cDNA被显著富集。合并一轮杂交物，加入过量变性D - cDNA ，作第二轮杂交。合并的二组份一轮杂交物中剩下的趋同化、经消减杂交后的单链T - cDNA 能互补杂交，可以形成: 原组内T- cDNA 单链间的杂交、T - cDNA 与D - cDNA 单链间的杂交、二组间T- cDNA 单链间的杂交。补齐杂交反应后双链cD2NA 末端，用分别与接头1 和2 的外侧部分序列互补的寡核苷酸为引物，作PCR 扩增。二组份间T- cDNA 互补单链杂交物，因两端分别具有接头1 和2 ，可被指数扩增;T - cDNA 与D -cDNA 杂交物和剩余单链T- cDNA ，因一端具接头序列，被线性扩增;而同组间T- cDNA 杂交物两端具反转重复长序列，因抑制性PCR 效应，在PCR 反应循环中分子内退火形成稳定的“锅柄结构”〔19〕而不被扩增。因此，SSH 技术通过二轮消减杂交和抑制性PCR 特异扩增，使假阳性大大降低，提高了检出低丰度靶mRNA 的灵敏度。Hu 等〔21〕应用SSH 技术，结合反转录酶的模板切换(tem2plate - switching) 功能，以HCV RNA 阳性血清体外感染的人MOLT- 4 急性淋巴母细胞白血病T 细胞系为模型，通过反转录合成全长cDNA、抑制性消减杂交、消减的cDNA 文库构建、反相斑点杂交筛选，在被筛的96 个克隆里，T- cDNA 探针杂交呈特异阳性的16 克隆中，序列分析后得到4 个插入HCV 序列的克隆。2 非特异多重引导滚环式扩增法乳头瘤病毒、痘病毒等，其基因物质为环状DNA 分子。在事前未知基因序列的情况下，发现和鉴别这类病毒核酸序列还可选择非特异多重引导滚环式扩增法(multiply primed rolling -circle amplification ，RCA) ，扩增、分离、获取其基因片段供进一步分析。自然状况下，环状DNA 经常以滚环方式进行复制。Dean等〔22〕应用随机6 聚核苷酸作引物，加入φ29 DNA 聚合酶，以质粒DNA 和噬菌体DNA 为模型，建立了多重引物引导的滚环式扩增法。φ29 DNA 聚合酶可长距离( > 70 000 nt) 地结合于DNA模板，进行链置换DNA 合成。而随机6 聚核苷酸引物可多位点的与单链环状DNA 互补复性。在φ29 DNA 聚合酶作用下，以随机引物引导，合成与模板互补的DNA 链。当合成链延伸到与模板结合的随机引物5′端时，在φ29 DNA 聚合酶的链置换活性作用下，下游被延伸的随机引物链被“甩”出模板。而上游的延伸链继续在环状模板上复制合成。同时，被从单链环状模板上“甩”出的互补链，又成为新的模板，随机引物与之结合，在φ29 DNA 聚合酶作用下，继续以枝杈的形式进行链延伸和链置换，最后以双链DNA 串联体形式释放。用此法可使1 ng 纯pCU18 环状DNA 模板延展式地扩增至107倍。Rector 等〔23〕以此原理建立了不依赖已知的特定基因序列(非序列依赖性) 的多重引导滚环式扩增环状DNA 病毒基因组方法，并应用其扩增获取了HPV 16 的基因组DNA。在接近实样的试验样品中，由于稀释倍数和环状DNA 分子较大等原因，将HPV 16 基因组DNA 扩增了214 ×104 倍。3 病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增病毒核酸可包裹于病毒外壳内，病毒的蛋白外壳或脂膜对病毒核酸具有保护作用。而病毒颗粒具有不同于细菌或其他真核细胞的理化特性。利用这样的特点Allender 等〔24〕和Stang等〔25〕各自建立了病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增方法(sequence - independent amplification) 。两种方法的共同点在于，依据病毒颗粒小、具一定密度，用0122μm 滤器过滤、或再串上超速密度梯度离心，从样品中分离出病毒颗粒，DNA 酶酶解游离的DNA ，裂解病毒颗粒，抽提获取较纯的病毒颗粒相关核酸。Allender 等〔24〕借鉴RDA 原理，对病毒颗粒相关核酸用限制性内切酶酶切后，作非序列依赖性单引物PCR 扩增( sequence -independent single primer amplification ，SISPA) :将抽提获取的DNA或RNA 分别补齐，合成第二链DNA ，或反转录，合成双链cDNA。限制性内切酶酶切后，酶切片段两端连接一种接头，并以与接头同序列的单一寡核苷酸为引物，作PCR 扩增。扩增产物进一步克隆与序列分析。用此法检验HBV 阳性血清和GBV - B 阳性血清样品，结果在相当于106/ ml 个基因组拷贝浓度的50μl样品中，可重复试验检出相应的病毒基因片段。Stang 等〔25〕则在得到双链DNA 或双链cDNA 后加入k - 随机引物，此种引物5′端含有20 个固定序列的核苷酸，3′端则有·318 · 中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med ， June 2007 ， Vol18 No13© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing H All rights 核苷酸随机简并序列。与变性模板退火时，6 核苷酸随机简并序列随机地与模板相应序列互补退火，在T4 DNA聚合酶作用下作链延伸。然后在延伸产物中加入k - 随机引物中固定序列部分的20 寡核苷酸作引物，进行PCR 扩增。扩增产物电泳分析、克隆、测序。用此方法检验由实时- PCR 定量，包括病毒颗粒相关核酸及游离核酸在内的病毒基因组拷贝数为109/ ml 的Cox - 3 和MAV - 1 培养物。前者的12 克隆中，9 个克隆插入有肠道病毒的四个不同区域的同源基因片段;而6 个MAV - 1 中分离的克隆内，5 个含有99 % 同源MAV - 1 基因片段。基于病毒颗粒分离纯化、DNase 处理、病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增，获取、鉴定未知病毒的基因片段，尽管灵敏度不够高，但其实验时间较短，步骤相对简单，对于病毒拷贝数高，时间紧急的样品鉴别，是较适宜的一套方法。病毒的种类、结构、特性多种多样，感染病毒后需要检验的样品又各不相同，因此用于发现鉴别未知病毒的核酸序列的技术，也不是固定不变和完全通用的。以上的技术方法各有优缺点和适用范围。而针对扩增获取未知病毒基因组序列片断，这一发现鉴定未知病毒的分子生物学技术的要点或瓶颈，必然还会有新的改进、创新技术出现，将会更快、更灵敏、更简便、更准确的发现鉴别未知病毒。参考文献〔1〕 Drosten C ， Gunther S ， Preiser W， et al1 Identification of novel corona2virus in patients with severe acute respiratory syndrome1 N Engl J Med ，2003 ， 348 : 1967 - 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科技小论文范文1：树干为什么是圆的在观察大自然的过程中我偶然发现，树干的形态都近似圆的——空圆锥状。树干为什么是圆锥状的?圆锥状树干有哪些好处?为了探索这些问题，我进行了更深入的观察、分析研究。在辅导老师的帮助下，我查阅了有关资料，了解到植物的茎有支持植物体、运输水分和其他养分的作用。树木的茎主要由维管束构成。茎的支持作用主要由木质部木纤维承担，虽然木本植物的茎会逐年加粗，但是在一定时间范围内，茎的木纤维数量是一定的，也就是树木茎的横截面面积一定。接着，我们围绕树干横截面面积一定，假设树干横截面长成不同形状，设计试验，探索树干呈圆锥状的原因和优点。经过实验，我们发现：(1)横截面积和长度一定时，三棱柱状物体纵向支持力最大，横向承受力最小；圆柱状物体纵向支持力不如三棱柱状物体，但横向承受力最大；(2)等质量不同形状的树干，矮个圆锥体形树干承受风力最大；(3)风是一种自然现象，影响着树木横截面的形状和树木生长的高矮。近似圆锥状的树干，重心低，加上庞大根系和大地连在一起，重心降得更低，稳度更大；(4)树干横截面呈圆形，可以减少损伤，具有更强的机械强度，能经受住风的袭击。同时，受风力的影响，树干各处的弯曲程度相似，不管风力来自哪个方向，树干承受的阻力大小相似，树干不易受到破坏。以上的实验反映了自然规律、自然界给我们启示：(1)横截面呈三角形的柱状物体，具有最大纵向支持力，其形态可用于建筑方面，例如角钢等；(2)横截面是圆形的圆状物体，具有最大的横向承受力，类似形态的建筑材料随处可见，如电视塔、电线杆等。在我的观察、试验和分析过程中，逐渐解释、揭示了树干呈圆锥状的奥秘，增长了知识，把学到的知识联系实际加以应用，既巩固了学到的知识，又提高了学习的兴趣，还初步学会了科学观察和分析方法。范文2：皮鞋为什么越擦越亮每到星期天，我总要完成妈妈交给我的擦鞋任务。告诉你，这可是我一星期零花钱的来源哦!拿到沾满灰尘的皮鞋后，我先把鞋面的灰尘擦掉，然后涂上鞋油，仔仔细细地擦一擦，皮鞋就会变得又亮又好看了。可这是为什么呢我找了同样牌子同样款式的新旧两双皮鞋进行对比观察。我先用手触摸两双皮鞋的鞋面，发现新皮鞋的表面比旧皮鞋的表面光滑得多。旧皮鞋涂上鞋油，仔细擦过后，虽然亮了许多，但仍无法与新皮鞋相比。皮鞋的亮度是否与鞋面的光滑程度有关呢? 我取来一双没擦过的旧皮鞋，在放大镜下鞋面显得凹凸不平的。然后，我再在皮鞋上圈出两块表面都比较粗造的A区和B区，A区涂上鞋油并仔细擦拭，B区不涂鞋油作空白对照。我发现A区擦拭后，表面明显变光滑了许多，而且放在阳光下也比B区有光泽。为什么两者会产生这样的差别呢? 我想到在物理课上老师曾经讲过：影剧院墙壁的表面是凹凸不平的，这样可以使声音大部分被吸收掉，让观众不受回声的干扰。同样道理，光线照到任何物体的表面都会产生反射，假如这个平面是高低不平的，光线就会向四面八方散射掉；假如这个平面是光滑的，那么我们就可以在一定的方向上看到反射光。皮鞋的表面原来就不是绝对的光滑，如果是旧皮鞋，它的表面当然更加的不平，这样它就不能使光线在一定的方向上产生反射，所以看上去没有什么光泽。而鞋油中有一些小颗粒，擦鞋的时候这些小颗粒正好可以填入皮鞋表面的凹坑中。如果再用布擦一擦，让鞋油涂得更均匀些，就会使皮鞋的表面变得光滑、平整，反射光线的能力也加强了。通过实验，我终于知道了皮鞋越擦越亮的秘密啦! 范文3：醋对花卉有什么影响醋是生活中常用的调味品，花卉则能净化生态环境，并美化我们的生活。你是否想到过，醋和花卉有什么关系呢?我们怀着好奇心，开展了这个课题的探究。据富有种花经验的人告诉我们，对盆栽花卉施些醋溶液，可改善盆花的生长，增加花朵，而且花艳叶茂。这一点我们在实验中很快就证实了。浓度不同的醋溶液，对花卉有不同的影响吗?这是我们第二阶段的实验。我们选取长势相同的满天星、报春花、月亮花各四盆，分为四组，每组（三盆）各有三种花卉，分别编号、贴上标签。同时，我们取食用白醋配制成1％（pH值为2~3）、0．01％（pH值≈4）、0．0001％(pH值≈6)三种浓度不同的溶液，每天分别给三组盆花固定喷洒一种醋液，第四组盆花洒不含醋的清水。每五天观察记录花卉的生长情况。这项实验的结果是：喷洒低浓度醋液(pH值≈6)对这几种花卉没有明显影响；喷洒中等浓度醋液（pH值≈4）的花卉明显长得比其他几组好，花苞多，开花期提前，而且花色较浓艳，花期也延长了；喷洒pH值2－3的高浓度醋液后，反而使花朵过早凋萎。通过这次实验，我们可以告诉你：种花时适当喷洒一些醋液，可使花卉长得更好。不过要掌握好醋液的浓度，醋酸过浓则会伤害花卉。