自噬研究指南论文题目
右哉 [细胞自噬] 2016-01-07
最近自噬的研究都很火，耐药不耐药，凋亡不凋亡的都开始往上扯了。
这篇文章的题目是："Ulinastatin Reduces the Resistance of Liver Cancer Cells to Epirubicin by Inhibiting Autophagy"，基本上可以作为入门级自噬研究的参考模板了。
文章思路是这样的：首先文章证明了EPI能诱导肝癌细胞自噬，而UTI能抑制这样的自噬；然后UTI能促进EPI诱导的细胞凋亡；接着证明UTI是抑制自噬从而促进了EPI诱导的凋亡；然后证明了UTI是通过NF-kB信号通路起到了这样的作用；最后做了一下成瘤实验。
我们就看第一个Fig，就基本能了解自噬他们究竟做了点啥。
自噬研究基本可以分这样几个层次：
1.证明自噬参与了你的研究表型：****western检测LC3，p62；LC3双荧光测细胞自噬流；电镜观测自噬；
自噬形成时胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。
但LC3的抗体会对LC3-II有更高的亲和力，所以往往会造成假阳性。所以通常会使用LC3的亚细胞结构定位来辅助实验。比如这篇文章所采用的就是HanBio Inc.（汉恒生物）的****mRFP-GFP-LC3的腺病毒进行分析的。
2.证明自噬在你的表型中起了关键作用：****加自噬抑制剂3-MA，激动剂rapamycin等，然后检测表型（功能）；
这里就用到了两种自噬抑制剂：3-MA和CQ（Chloroquine）。
3.找到表型与自噬衔接的分子：****检测自噬通路如pI3K 通路，Beclin-1，ATG家族各成员,看看哪个与表型呈现正相关变化;
4.基因操作3中的分子,检测自噬和表型****：说明该分子在衔接自噬和表型中的作用机制;
这一点需要运用到的也就是柯霍氏法则和回复实验。
…华丽丽的分割线…
李莫愁博士：****而普通的自噬研究，也就是这样一个模式：（感谢汉恒生物的蔡博士为我们整理）
自噬表型研究中，较为常用的就是采用汉恒的mRFP-GFP-LC3融合蛋白的腺病毒，对细胞进行了感染。mRFP 用于标记及追踪LC3，GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体，即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感，当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。
就像是这样：
（2014，Kidney International，IF=）
（该实验所用自噬工具为汉恒生物Ad-mRFP-GFP-LC3双标腺病毒）
2015年12月17日，中国科学院生物物理研究所张宏课题组和日本微生物化学所Nobuo N. Noda课题组合作，在国际刊物《分子细胞》（Molecular Cell）上，在线发表了题为Structural basis of the differential function of the two C. elegans Atg8 homologs, LGG-1 and LGG-2, in autophagy的研究论文，揭示了线虫中两个Atg8的同源基因LGG-1和LGG-2在蛋白聚集体自噬降解中的不同功能。 此研究对线虫中两个Atg8的同源基因LGG-1和LGG-2进行了结构和功能上的研究。不同于lgg-1在蛋白聚集体自噬过程中的不可或缺，lgg-2表现出了不同降解底物的特异性和不同发育阶段的特异性。LGG-1和LGG-2可以与不同的细胞自噬底物和自噬蛋白相互作用，这些互作蛋白几乎都含有LIR motif。基于LGG-1和LGG-2结构的差异，它们对不同类型的LIR motif存在特异的偏向性，并确保了自噬蛋白被招募的先后顺序，进而决定了它们在自噬降解作用的不同步骤发挥作用。
细胞自噬研究论文
在研究细胞自噬与肿瘤的关系实验中应该用什么为研究对象 求解答 毕业论?jno
没有，细胞自噬是真核生物特有的依赖于溶酶体的细胞内降解过程。多说一句，目前所知的大多数自噬基因（autopahgy-related gene, ATG）正是利用最简单的单细胞真核生物——酵母筛选出来的。细胞自噬其实可分为3种类型：巨自噬（macroautophagy）、微自噬（microautophagy）和分子伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy, CMA）。其中，广为研究的主要是巨自噬，其显著标志就是需要在细胞质内形成双层膜的自噬小体，如果没有特别说明，细胞自噬一般而言指的就是巨自噬。早年间，细胞自噬领域主要关注参与自噬过程的核心蛋白。随着越来越多的ATG基因被鉴定，这些自噬蛋白如何响应自噬信号成为细胞自噬领域新兴的研究热点。其中，蛋白乙酰化（acetylation）在细胞自噬调控中发挥重要作用。2012年，清华大学的俞立实验室和厦门大学的林圣彩实验室在《Science》上背靠背发表了了两篇关于蛋白乙酰化调控细胞自噬的论文，掀起了蛋白乙酰化调控细胞自噬研究的热潮。截至目前，近10年间，一系列自噬相关蛋白被不同的实验室发现均可受到蛋白乙酰化的调控，确立了蛋白乙酰化在细胞自噬调控中的核心地位。日前，一篇发表于《Autophagy》的综述文章，系统总结了蛋白乙酰化在细胞自噬中的调控作用和分子机制，该综述依据细胞自噬过程的不同阶段依次介绍相关的蛋白，条理清晰，非常有助于大家快速了解蛋白乙酰化与细胞自噬的关系。1、细胞自噬的起始阶段参与细胞自噬起始的主要是ULK1复合物和PIK3C3/VPS34复合物。在生长因子剥夺的条件下，ULK1复合物中的ULK1被乙酰转移酶TIP60/KAT5乙酰化后，激活其激酶活性，启动细胞自噬。与此相反，在营养不足的条件下，由于乙酰转移酶EP300/p300的失活，VPS34复合物的其他组分VPS34和BECN1/Beclin 1的乙酰化水平显著下降，导致VPS34复合物的激活，启动细胞自噬。显然，TIP60和p300介导的蛋白乙酰化在细胞自噬的起始阶段发挥相反的作用。2、LC3脂质化阶段LC3的脂质化是细胞自噬过程中的关键事件，只有完成脂质化的LC3蛋白才能结合于自噬小体膜上，参与后续的细胞自噬过程。目前的研究发现，多个参与LC3脂质化修饰的ATG蛋白均受到蛋白乙酰化的调控。其中，TIP60/Esa1介导的ATG3的乙酰化通过加强ATG3与LC3/Atg8的相互作用促进后者的脂质化。而EP300/p300介导的LC3，ATG5，ATG7和ATG12的乙酰化则会抑制LC3的脂质化。3、自噬底物的组装阶段自噬受体SQSTM1/p62除了能够将待降解的自噬底物送到自噬小体内，还参与自噬底物的组装过程。其中，p62通过其UBA结构域结合泛素化的底物是其促进自噬底物组装所必需的步骤。研究发现，在营养剥夺的条件下，KAT5/TIP60通过乙酰化p62位于UBA结构域的两个赖氨酸，促进p62与泛素化底物的结合，进而促进自噬底物的组装。4、自噬小体—溶酶体融合阶段在营养剥夺条件下，乙酰转移酶CREBBP/CBP失活，其介导的SNARE分子STX17的乙酰化水平下降，促进其与SNARE分子SNAP29和VAMP8组装成SNARE复合物，介导自噬小体-溶酶体的融合。与此相反，KAT5/TIP60介导的Pacer/RUBCNL的乙酰化则会促进自噬小体-溶酶体的融合。5、细胞自噬的转录调控转录因子TFEB通过促进细胞自噬和溶酶体相关基因的转录，是促进细胞自噬-溶酶体途径主要的转录因子。研究发现，乙酰转移酶KAT5A/GCN5和ACAT1均可通过乙酰化TFEB调控其转录活性，进而从转录水平调控细胞自噬和溶酶体发生。有趣的是，KAT5A介导的乙酰化抑制TFEB的活性，而ACAT1介导的乙酰化则会激活TFEB的活性。作者提到，二者介导的乙酰化可能通过靶向不同的修饰位点发挥相反的作用。除了转录因子，组蛋白的乙酰化也参与调控自噬相关基因的转录。KAT5/TIP60与KAT8/MOF介导的组蛋白H4的乙酰化分别激活和抑制自噬相关基因的转录。从以上总结不难看出，蛋白乙酰化在细胞自噬中的调控作用主要由乙酰转移酶决定。如KAT5/TIP60和p300/CBP，前者介导的自噬相关蛋白的乙酰化主要促进细胞自噬，而后者介导的自噬相关蛋白的乙酰化则主要抑制细胞自噬。当然，有些自噬相关蛋白的乙酰化影响细胞自噬的潜在机制还有待阐明。另外，除了目前已知的底物，细胞自噬途径中的其他蛋白是否受到蛋白乙酰化的调控也是领域内值得关注的问题
研究论文写作指南
1、 写论文时候，最好一气呵成
千万不要犹豫，今天写点，明天写点的样子。那样往往写不好论文。一篇SCI论文，我想，一般最多用一周多一点的时间写完主体部分;而一般会议论文2,3天即可。当然，一些实验可能需要时间长些。无论如何，不可以拖延。可以说，每篇论文都可以发表，所以你写出的论文肯定是有成果的。
2、 写论文时候，有些需要注意的语言表述的地方
首先，尽量拼写、语法正确。保证全文没有单词错误和明显的语法错误，这个非常重要。论文学术是非常严谨的，错误拼写容易让人觉得水平不高。另外，写作句子尽量简单，每个句子只包含一个意思，这个和中文论文差别很大。记住一定用简单的句子，一般情况下，即使算上从句也尽量不要超过两句话。第三，避免用口语。例如so、the same as、one hand…on the other hand等等。从native和好的论文里面，把重要的连词的应用学好。如therefore，however，moreover等等，尽量装着学术化一些。第四，尽量避免第一人称，we怎么怎么地。
3、 论文的组成元素
通常，包括图形、公式、算法、证明等等。论文应该是图文并茂的。通常情况下，如果读者是同一领域的研究人员，他们看完论文的图片及图注就可以知道这篇文章大体所做的工作。因此，要标注好每一幅图片所展示的信息，但尽量简洁。图和文本要保持一致，并且互为补充，所有图在论文中都是必须提及的。
以上就是环球青藤小编关于论文写作方法的分享，最后，好的论文要有好的明确的题目，我们一般是要先写一个然后整篇论文写好后，再修改、定稿。
科技论文写作格式指南
在科技期刊和学术会议论文中，以通用型格式的应用最为广泛。通用型格式的论文，一般包括下列项目∶标题、作者姓名及单位、摘要及关键词、前言、正文、结尾、谢辞、参考文献和附录。
下面，我们对通用型格式论文中各部分的写作特点，分别加以介绍。
1、标题
标题，又叫题目，有总标题与层次标题之分。我们在这里要讨论的，是论文的总标题。
标题是论文的旗帜、眉目、窗口和向导，是牵动全文神经的关键，是对读者的第一吸引。因此，它应当是论文内容的高度概括，应当是“提纲的提纲”。标题不仅对论文内容具有极为重要的提示作用，而且也是论文分类的重要依据。人们阅读论文，总是先看题目，然后决定是否阅读摘要或全文;而题录、索引等二次文献，也大多只列举题目和出处。因此，一个好的论文标题，不仅应能向读者或文摘人员显示出论文的关键内涵和研究工作的大致水平，而且应能对本专业的读者产生强烈的吸引力。
科技论文对标题的主要要求
(1)确切∶确切是指标题能恰如其分地反映问题的实质，精当地概括论文的中心内容，尽量体现研究工作所达到的深度和范围。不能使用过于笼统的、泛指性很强的词语，更不能使用经过艺术加工的、华而不实的词藻或口号式的语言。此外，标题的用词要确切，文字必须符合语法、修辞和逻辑规则，并应尽量避免使用不规范的缩略语、字符、代号和公式等。
(2)简洁∶简洁是指在准确的前提下，力求文字精炼，字数越少越好。也就是说，对论文的标题，在字数上要尽量“吝啬”，应追求“添一字嫌多，去一字嫌少”。一般情况下，中文标题不要超过20个汉字,英文标题不要超过12个实词;如在此字数范围内确实不能解决问题时，可采用加副标题的办法。目前科技论文的标题在总体上有偏长的倾向，应当引起注意，因过长的标题很难引人注目。
(3)鲜明∶鲜明是指标题醒目，使人一看就知其意，不费解，无歧义，便于记忆和引用。
拟定科技论文标题时常见的错误
(1)大而空泛，不着边际∶例如，“论机械CAD”;“流体传动研究”。
(2)过分拔高，华而不实∶例如，“一种具有世界先进水平的开口销”;“填补国际空白的机床操作手柄的研究”。
(3)流于一般，毫无生气∶例如，“凸轮机构浅谈”;“介绍一种微量进给机构”。
(4)以“新”为本，目标笼统∶例如，“新型离合器的设计计算”;“夹紧螺钉与压板的结构改进与创新”。
(5)过分抽象，不知所云∶例如，“零件相关信息的采集技术”;“基于范例推理刀具几何参数选择决策器的研究”。
(6)罗嗦有余，实质不足∶例如，“基于市场分析的商品化产品设计中的影响商品化的因素研究及其体系构成”。
论文标题字数虽少，但有写作经验的作者无一不对其倾注了相当大的精力，以致于往往在论文定稿时，才能最后敲定论文的题目。
2、署名
凡是在课题研究、论文撰写过程中做出了实质性贡献，能对论文的全部或某一部分负责的人，都有署名的权力和义务。署名不仅是作者辛勤劳动的体现和应获得的荣誉，而且也表示作者对论文内容的真实性等负有责任。
个人的研究成果由个人署名;集体研究的课题，应按贡献大小的顺序排列署名。只参加过宏观性计划讨论或只承担绘图、文字录入等具体工作，对课题实质缺乏了解，对论文的任何一部分均不能负责的人，不应署名。署名作者的数量也应控制。对5000字左右篇幅的论文，署名人数建议不要超过5人;篇幅较小的论文，署名人数一般不应超过3人。此外，署名一般应当用真实姓名，不用笔名。
目前，在科技论文中“挂名”、“送名”、“争名”之类的不正之风，常有发生。这种做法不仅违反科学精神、科学道德的基本准则，而且违反社会道德的基本准则，应该引起重视并努力加以避免。
3、摘要和关键词
摘要
摘要是对论文基本内容的简要陈述，可以说是论文的缩影。它在论文的标题和全文之间，起着桥梁的作用。读者是否阅读全文，一般在他阅读完摘要以后就能决定了。此外，摘要也能给文摘者提供方便。
摘要的.种类，主要有指示性摘要和报道性摘要两种。指示性摘要只叙述论文内容的精华，不涉及研究方法、结果和结论，其字数一般只有30~50字，少的甚至仅有十几个字。报道性摘要一般包括研究课题的目的、范围、重要性，所采用的理论、方法，得到的结果、结论等，其中，结果、结论是重点。报道性摘要的篇幅，一般为正文文字的2~5%。笔者建议，期刊论文中的中文摘要不要超过200个汉字，英文摘要不要超过100个实词。
对报道性摘要的主要要求，是简短、精练、完整。所谓完整，是指摘要应具有独立性和自含性，即其内容应包含与原文等量的主要信息，可以独立成篇，可供文摘人员直接采用。
摘要应当用第三人称写，不要用传统的“本文……”这样的第一人称叙述;一般情况下，摘要不要分段;摘要要用规范的术语，一般不宜出现插图、表格、数学公式及参考文献序号等。
关键词
关键词是最具有实质意义的检索语言，其主要作用就在于方便检索。因此，应当选取在论文中起关键作用的、最能说明内容实质的单词、短语或术语作为关键词。关键词的数量一般为3~8个，它们之间仅仅是一种简单的组合，不必要考虑语法结构，也不必要表达一个完整的意思。
经过规范化处理的关键词，称为叙词。目前有少数杂志要求采用叙词，如《机械工程学报》、《农业机械学报》等。叙词的选择不如关键词来得方便，需要查阅相应的叙词表。与机械工程科学相关的叙词工具书是《机械工程叙词表》。
对于论文标题与关键词选取的关系，有两种截然相反的观点。一种观点认为标题中的词与关键词重复是一种浪费，另一种观点认为标题中应尽可能多地包含关键词。笔者倾向于后一种观点。因为标题要高度概括论文的内容，关键词应对说明论文的内容实质起关键作用。所以，如果关键词选择精当的话，一个好的论文标题中存在重复它们的词几乎是不可避免的;反之亦然。
吞噬细胞的分类研究的论文
医学科研实验基础知识笔记（四）：细胞自噬研究策略
细胞自噬是指细胞在外界环境因素的影响下， 细胞利用溶酶体降解自身受损、 变性或衰老的大分子物质以及细胞器的自我消化过程。自噬是细胞的一种自我保护机制， 广泛存在于真核细胞内， 在调节细胞生存和死亡的过程中， 起着重要的作用。
当细胞发生自噬后， 在自噬相关基因的调节下， 细胞通过单层或双层膜， 包裹待降解的细胞质或细胞器， 形成囊泡状的自噬体（autophagosome） 。然后自噬体再和溶酶体（lysosome）
发生融合形成自噬溶酶体（autolysosome） ， 由溶酶体内的一系列水解酶， 降解自噬溶酶体内所包裹的内容物， 以实现细胞对自身代谢和能量的更新。
1.自噬的细胞学分类及过程
根据细胞内物质运输到溶酶体的方式以及生理功能的差异， 哺乳动物的细胞自噬可以分为三种类型：大自噬/宏自噬（macroautophagy） ， 小自噬/微自噬（microautophagy） 和分子伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy， CMA） 。
1） 大自噬/宏自噬：我们通常所说的自噬指的就是大自噬/宏自噬。在大自噬的过程中， 细胞质中可溶性的大分子物质以及变性的细胞器， 被内质网、 线粒体来源的单层或双层膜包裹形成自噬体。接着自噬体的外膜与溶酶体膜融合， 进一步形成自噬溶酶体， 自噬体内的待降解物被一系列的水解酶降解， 最终完成整个的自噬过程。
2） 小自噬/微自噬：与大自噬过程不同， 是溶酶体膜自身发生内陷， 包裹和吞噬细胞内待降解的底物， 并在溶酶体内发生降解。小自噬与大自噬的区别就在于， 在小自噬过程中胞质成份是直接被溶酶体包裹， 没有形成自噬体的过程。
3） 分子伴侣介导的自噬：在分子伴侣介导发生的自噬过程中， 其待降解的底物都是可溶性的蛋白质分子。分子伴侣蛋白识别带有特定氨基酸序列的底物蛋白质分子， 并与之结合， 然后再经溶酶体膜上的受体 Lamp2a（lysosome-associated membrane protein 2， Lamp2） 转运到溶酶体；底物蛋白分子再在溶酶体内， 被水解酶降解。因此， 分子伴侣介导的自噬与前两者不同， 在降解蛋白时具有选择性。而大自噬和小自噬现象中， 一般而言， 在降解蛋白时没有明显的选择性。
2.自噬信号通路
3.自噬与凋亡的关系
细胞凋亡也被称为 I 型程序性细胞死亡；自噬则被称为 II 型程序性细胞死亡。凋亡和自噬是两种显著不同的细胞死亡形式， 两者在形态、 生化指标以及调控细胞死亡的过程上都存在着较大的差异， 但两者又不是两个完全独立的过程。许多研究表明， 凋亡和自噬的作用以及功能在某些情况下也是相互影响和制约的。自噬和凋亡之间存在着三种不同类型的相互作用，而且每种类型都对应着相应的特定的细胞类型、 刺激和环境。
1） 自噬和凋亡互相协同， 共同促进细胞死亡。两种效应之间， 可以其中一种效应影响另一种效应；自噬也可以作为凋亡的上游调节因子， 直接调控细胞凋亡， 从而影响细胞的死亡；
2） 自噬可以通过促进细胞存活而拮抗细胞的凋亡效应。比如， 可以通过去除因氧化应激受损的细胞器， 或降解变性的大分子物质， 为饥饿的细胞提供生存所需要的营养和能量；或者通过降解未折叠的蛋白来抑制内质网应激。自噬的这些功能将会抑制促凋亡信号的产生， 从而起到拮抗细胞凋亡的作用。
3） 自噬有时虽然自身并没有导致细胞死亡， 但却参与了细胞凋亡的过程。比如自噬参与了一些 ATP 依赖的凋亡过程。
4.自噬的分子机制和特征
1） 自噬诱导阶段（induction） ：正常生理状态下， 细胞保持很低的基础自噬水平。这时细胞内能量充足，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物 1(也就是 mTOR 复合物 1，也叫做 mTORC1)处于活化的状态。活化的 mTORC1 通过磷酸化的方式使得 ATG13 发生磷酸化反应， 从而抑制细胞的自噬。
2） 成核过程（vesicle nucleation） ：成核过程和 Vps34-ATG6 复合物密切相关。这个复合物还包含有调节性蛋白激酶 Vps15， 共同作用于膜泡的成核， 介导 PAS(也就是前自噬体结构pre-autophagosomal structure)的形成。
Vps34-ATG6 复合体还可以召集 ATG12-ATG5 和 ATG16 多聚体以及 LC3， 并通过后两者促进吞噬泡的伸展扩张。请大家注意， Vps34 在哺乳动物中的同源蛋白是 class III PI3K；ATG6在哺乳动物中的同源蛋白是 Beclin-1， 所以 Vps34-ATG6 复合体， 也被称为 PI3K-Beclin-1复合物。
3） 自噬体的延伸阶段：这个过程的分子机制是最为复杂的。哺乳动物自噬体的延伸主要依赖于两个类泛素化的系统：a） ATG12 的结合过程；b） LC3 的修饰过程。
ATG12 的结合过程是类似泛素化的过程， 需泛素活化酶 E1 和 E2 的参与。ATG12 首先由 E1样酶 ATG7 活化， 再通过 E2 样酶 ATG10 转运并结合 ATG5， 然后和 ATG16 结合， 生成ATG12-ATG5-ATG16 的多体复合物。这个复合物定位于前自噬体结构的外膜表面， 并参与前自噬体外膜的扩张。
LC3 在酵母中的同源基因是 ATG8。LC3 的修饰过程同样需要类似泛素活化酶 E1 和 E2 的参与。LC3 前体形成后被 ATG4 加工成胞浆可溶性的 LC3-Ⅰ， 然后在 E1 样酶 ATG7 和 E2样酶 ATG3 的作用下， 和磷脂酰乙醇胺(PE)共价连接成为脂溶性的 LC3-PE（也就是 LC3-II），并参与膜的延伸。LC3-Ⅱ能够与新形成的膜结合， 直到自噬溶酶体(Autolysosome)的形成。因此， LC3-Ⅱ常用作自噬形成的标识物， 也是一种重要的定位于自噬泡膜上的多信号传导调节蛋白。
哺乳动物的 ATG12-ATG5 类泛素化过程和 LC3 类泛素化过程并不是独立运行的， 它们之间可以相互作用、 相互调节。
4） 自噬体的成熟阶段：自噬体的成熟主要是指自噬体通过微管骨架在转运必须内吞体分类复合物(ESCRT)和单体 GTP 酶(Rab S)作用下， 与溶酶体融合形成自噬溶酶体的过程。参与成熟阶段的溶酶体相关蛋白还包括：LAMP1、 LAMP2、 UVRAG(紫外线抵抗相关肿瘤抑制基因)。
5） 自噬体的裂解阶段：是指自噬溶酶体膜的裂解及内容物在溶酶体水解酶的作用下降解的过程。降解过程中产生的氨基酸及部分蛋白可以为细胞提供营养、 能量或循环利用。
5.自噬诱导剂
a) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激
b) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chloride（氯化锂）：IMPase 抑制剂（即Inositol monophosphatase，肌醇单磷酸酶）
c) Earle's平衡盐溶液：制造饥饿
d) N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：Class I PI3K Pathway抑制剂
e) Rapamycin：mTOR抑制剂
f) Xestospongin B/C：IP3R阻滞剂
6.自噬抑制剂
a) 3-Methyladenine（3-MA）：（Class III PI3K） hVps34 抑制剂
b) Bafilomycin A1：质子泵抑制剂
c) Hydroxychloroquine（羟氯喹）
除了选用上述工具药外，一般还需结合遗传学技术对自噬相关基因进行干预：包括反义RNA干扰技术（Knockdown）、突变株筛选、外源基因导入等。
7.自噬的检测手段
自噬的评估通常采用多个自噬阶段的标志物，因为自噬小体数量的增加可能是自噬上调也可能是自噬最后阶段降解被抑制所致，所以设置合适的对照很有必要。
（1）透射电镜，电镜观察自噬体和溶酶体的超微结构；
（2）WB检测标志物LC3/Atg8和p62/SQSTM1；生化检测自噬体膜标志蛋白， 特别是ATG12、 ATG5 和 LC3；荧光显微镜检测 LC3 或GFP-LC3 斑点的形成；生化检测自噬底物 p62。
（3）WB检测Lamps、Atg5、Atg14和Beclin-1。
（4）组织蛋白酶Cathepsin活力检测。
（5）IF检测自噬潮autophagic flux
自噬过程进行观察和检测 细胞经诱导或抑制后，需对自噬过程进行观察和检测，常用的策略和技术有：
（1）观察自噬体的形成
由于自噬体属于亚细胞结构，普通光镜下看不到，因此，直接观察自噬体需在透射电镜下。Phagophore的特征为：新月状或杯状，双层或多层膜，有包绕胞浆成分的趋势。自噬体（AV1）的特征为：双层或多层膜的液泡状结构，内含胞浆成分，如线粒体、内质网、核糖体等。自噬溶酶体（AV2）的特征为：单层膜，胞浆成分已降解。（autophagic vacuole，AV）
（2）在荧光显微镜下采用GFP-LC3融合蛋白来示踪自噬形成
由于电镜耗时长，不利于监测（Monitoring）自噬形成，人们利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了此技术。无自噬时，GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中；自噬形成时，GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜，在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点，一个斑点相当于一个自噬体，可以通过计数来评价自噬活性的高低。
（3）利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成自噬形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），因此，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。
（注意：LC3抗体对LC3-II有更高的亲和力，会造成假阳性。需要多种检测方法结合使用，同时需考虑溶酶体活性的影响。）
（4）检测长寿蛋白的批量降解：非特异
（5）MDC（Monodansylcadaverine，单丹磺酰尸胺）染色：包括自噬体，所有酸性液泡都被染色，故属于非特异性的。
（6）CellTrackerTM Green染色：主要用于双染色，但其能染所有的液泡，故也属于非特异性的。
自噬相关蛋白的定位 在研究自噬相关蛋白时，需对其进行定位。
由于自噬体与溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体关系密切，为了区别，常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位：
Lamp-2：溶酶体膜蛋白，可用于监测自噬体与溶酶体融合。
LysoTrackerTM 探针：有红或蓝色可选，显示所有酸性液泡。
pDsRed2-mito：载体，转染后表达一个融合蛋白（红色荧光蛋白+线粒体基质定位信号），可用来检测线粒体被自噬掉的程度（Mitophagy）。
MitoTraker探针：特异性显示活的线粒体，荧光在经过固定后还能保留。
Hsp60：定位与线粒体基质，细胞死亡时不会被释放。
Calreticulin（钙网织蛋白）：内质网腔
（注意：这些蛋白均为胞浆蛋白，爬片或胰酶消化的细胞在做免疫荧光前需先透膜（permeablize），可采用处理。）
8.自噬研究常规思路
通常情况下，除了研究自噬现象本身，大家更多的是将自噬与各种生命活动或者疾病结合起来，把自噬作为这些方向的一个机制来研究。比如研究自噬如何参与肿瘤的发生发展、如何参与肿瘤的耐药性与复发转移、如何参与肿瘤免疫治疗的效果、如何参与炎症反应、如何参与氧化应激，如何参与自闭症、阿尔兹海默症的发生与治疗等，通常的研究模式：
（1）证明自噬参与了相关研究表型（电镜、LC3II/I-WB、LC3亚细胞定位、LC3荧光示踪监测自噬流等）
（2）证明自噬在表型中起到关键作用（通过自噬抑制剂、激动剂进行关联研究）找到表型与自噬桥梁分子（检测pI3K通路、Beclin-1、ATG家族各成员）
（3）在基因层面通过gain of/lost of function研究桥梁分子在自噬中的作用。
9.研究自噬的文献参考
[1]. Emerging Mechanisms in Initiating and Terminating Autophagy. Trends Biochem Sci. 2017 Jan;42(1):28-41.
[2]. Targeting autophagy in cancer. Nat Rev Cancer. 2017 Sep;17(9):528-542.
[3]. Autophagy: controlling cell fate in rheumatic diseases. Nat Rev Rheumatol. 2016 Sep;12(9):517-31.
[4]. Crosstalk between autophagy and inflammatory signalling pathways: balancing defence and homeostasis. Nat Rev Immunol. 2016 Nov;16(11):661-675.
[5]. Autophagy and Neurodegeneration: Pathogenic Mechanisms and Therapeutic Opportunities. Neuron. 2017 Mar 8;93(5):1015-1034.
[6]. Activating autophagy to potentiate immunogenic chemotherapy and radiation therapy. Nat Rev Clin Oncol. 2017 Apr;14(4):247-258.
[7]. Epigenetic Control of Autophagy: Nuclear Events Gain More Attention. Mol Mar 2;65(5):781-785.
[8]. Pharmacological modulation of autophagy: therapeutic potential and persisting obstacles. Nat Rev Drug Jul;16(7):487-511.
机体在长期的进化过程中，在病原生物的压力下，适应产生了两套免疫系统，即天然免疫（innate immunity）和获得性免疫（acquired or adaptive immuniy）。天然免疫或称非特异免疫，存在于所有的多细胞生物，与生俱来，包括多种效应细胞和分子，如各种粒细胞、单核／巨噬细胞、树突状细胞（DC）、NK细胞和体液杀菌成分如补体、抗微生物肽、溶菌酶等。获得性免疫即特异性免疫，到脊椎动物才出现，是在个体发育过程中通过体细胞lg超家族基因重排而产生的抗原识别细胞，包括T和B淋巴细胞。自20世纪50年代末BURNET［1］提出克隆选择学说以来，对获得性免疫系统进行了广泛深入的研究，获得性免疫应答所涉及的细胞、蛋白质和基因的结构、功能及其机制诸方面均取得了许多重大的进展和突破，而天然免疫的研究进展缓慢。然而，90年代以来多种天然免疫识别分子的发现，其结构、功能的初步阐明，导致了90年代后期“天然免疫研究之崛起”［2］及其“复兴时代的到来”［3］。本文仅就其核心问题—“分子模式识别作用”及其免疫生物学意义作一概略介绍。1天然免疫识别分子及其“分子模式识别作用”天然免疫识别分子的种类天然免疫识别分子都是由胚系基因编码的蛋白质，根据结构特征分为7个家族（见表1），但一些分子如补体经典途径识别分子C1q、旁路途径识别分子C3、肽聚糖识别蛋白等尚未归类，而且，新的天然免疫识别分子还在不断发现之中。还可以从功能上将天然免疫识别分子分为循环于血浆中的体液蛋白、表达于细胞表面的内吞受体和细胞表面或细胞内的信号受体；按识别方式可分直接识别分子如CD14、DEC-205、胶凝素等和间接识别分子（识别天然免疫系统与病原体反应后的产物）如补体受体、Toll受体等。
人类的吞噬细胞有大、小两种。小吞噬细胞是外周血中的中性粒细胞。大吞噬细胞是血中的单核细胞和多种器官、组织中的巨噬细胞，两者构成单核吞噬细胞系统。当病原体穿透皮肤或粘膜到达体内组织后，吞噬细胞首先从毛细血管中逸出，聚集到病原体所在部位。多数情况下，病原体被吞噬杀灭。若未被杀死，则经淋巴管到附近淋巴结，在淋巴结内的吞噬细胞进一步把它们消灭。淋巴结的这种过滤作用在人体免疫防御能力上占有重要地位，一般只有毒力强、数量多的病原体才有可能不被完全阻挡而侵入血流及其它脏器。但是在血液、肝、脾或骨髓等处的吞噬细胞会对病原体继续进行吞噬杀灭。以病原菌为例，吞噬、杀菌过程分为三个阶段，即吞噬细胞和病菌接触、吞入病菌、杀死和破坏病原菌。吞噬细胞内含有溶酶体，其中的溶菌酶、髓过氧化物酶、乳铁蛋白、防御素、活性氧物质、活性氮物质等能杀死病菌，而蛋白酶、多糖酶、核酸酶、脂酶等则可将菌体降解。最后不能消化的菌体残渣，将被排到吞噬细胞外。细菌被吞噬在吞噬细胞内形成吞噬体；溶酶体与吞噬体融合成吞噬溶酶体；溶酶体中多种杀菌物质和水解酶将细菌杀死并消化；菌体残渣被排出细胞外。
研究生论文入门指南
研究生发表资格论文，如何找到适合投稿的期刊？
研究生怎样发表论文呢，下面给你一些建议：1.首先确定选题。选题很重要，看一下是否适合自己去做，ok！ 2、查阅资料，列提纲确定论文的内容。 分析阅读你论文的对象，他们的目的 善于应用图表表达完整信息 先列提纲（用来反应你的思路结构，征求别人意见） 写出草稿，写作时从最容易的地方入手（比如：仪器材料，实验方法，结果） 抽取有价值结果放入讨论，完成讨论，结论，引言 3、查阅资料，做试验，收集数据，写论文。 越早开始写越容易 有些研究可以先写文章，结果空留，等到实验有结果填入即可 再次强调： 实验开始，写作开始 绝不等所有结果出来再做 （尽可能）将实验结果列成图表（图表制作表达明了）草稿－－－不能太草如何避免太草：先阅读杂志的投稿指南 －－图表要求－－参考文献格式－－排版格式－－字数要求这样做的结果节省时间，避免迷失方向下笔：第一稿要完整，但不要过分追求完美前言：表明为什么要进行这项研究别人已经做了什么，存在什么样的问题（在查阅文献的基础上，不是拼凑！）我的研究做什么整个部分简明扼要，突出自己的重要性材料和方法清楚，突出可重复性详细比较好，利于以后学位论文的写作结果先制图表，然后由图表进行解释说明用图表突出最重要的部分讨论：讨论是建立在大量阅读文献，并进行总结的基础上概括主要发现提出局限性，以供别人进一步参考最后再总结突出我研究的重要性不重复前言与结果，引用支持你论点的文章，但不影响或降低文章的创新4、写完论文，找导师查阅，修改。文章修改（需要多次，这里第一次是概括的讲可以包含几次直至达到目的）第一次：自己修改明确：是否表达完全，别人能不能看懂，语句通顺，格式，标点等第二次：打印稿重点：结构与内容协调性，摘要是不是能够独立支撑文章内容，摘要和图表可否表达研究的大概内容第三次：请别人修改明确：不能让别人将精力花费在修改错别字和格式上面，考虑别人从另外角度给出的意见后期修改：检查文章的完整性和逻辑性再强调：文章的顺序不是完全照搬实验顺序，要考虑论文的整体结构框架敢于舍弃不必要的数据5、论文定稿后找一家刊物出版社发表论文 。
1、注意语言表达虽然科研论文可以说是对他人“讲故事”。但与一般的故事不同之处，个人认为，主要在于逻辑性与连贯性。表达方式应以顺叙为佳，不宜像诗歌、散文、小说之类的文艺作品，使用倒叙、插叙等手法。内容详略得当。该简略之处就要言简意赅，该详尽之处就要清晰全面，不要写成“流水账”，也不要写成“意识流”。结构要合理。可以按“提出问题（立论）→分析问题（讨论）→解决问题（结论）”的总体思路来谋篇布局。摘要、正文和结论的相关内容，要前后呼应。语言通俗易懂。论文是给别人看的，不要认为自己知道的，别人就一定知道。要使用书面语言，避免使用网络语言。语句长短合适，少用累赘的长句与跳跃的短句。遣词要恰当得体。比如，“推测”、“推断”与“推定”，语气是有所不同的（在英文文献中，常用的是suggest、indicate、maybe之类“容他性”的词语）。注意错别字。避免因一时的疏忽大意，而留下缺憾。比如，将“风云二号”写成“风韵二号”，“碳酸盐”写成“碳酸岩”。一字之差，天壤之别。正确使用标点符号。不要分号与顿号不分，一“逗（号）”到底等。建议同学们在闲暇时，可以多看看汉语言工具书。同时，也呼吁素质教育阶段，要切实重视母语—汉语的教学质量。2、数据、术语严谨规范严谨规范，是科研论文的主要特征之一。数据分析，避免“张冠李戴”。对数据进行判别时，不要将属性为A的对象，用B作为参照标准。计量单位，要符合国家标准或者相关行业规范。注意有效数字的取舍。并不是小数点之后位数越多就越精确，而是要与获得数据的方法手段结合起来。比如，利用一台精度为5%的仪器进行观测，数据应写成“19”，而不是“”。不能简单地照搬仪器报出值。高于检测上限、或低于检测下限的数据，应该用“>检测限”、“<检测限”、“未检出”或相应的英文缩写等表示。标注要详实。比如，采样位置图，应该有比例尺、方位、坐标、图例及说明等参数。图版中使用专业符号、代码表示对象时，应该附注相应的文字说明。
研究生论文写作技巧方法
一、研究生必备四本
俗话说好记性不如烂笔头，所以一定要首先养成做笔记的好习惯!作为研究生下面这几个 本子是必不可少的
1，实验记录本(包括试验准备本)，这当然首当其冲必不可少，我就不多说了;
2，Idea记录本，每次看文献对自己有用的东西先记下，由此产生的idea更不能放过，这可 是做研究的本钱，好记性不如烂笔头，以后翻翻会更有想法的;
3，专业概念以及理论进展记录本，每个人不可能对自己领域的概念都了如指掌，初入门者 更是如此，这时候小小一个本子的作用就大了;
4，讲座记录本，这本本子可能有些零杂，记录听到的内容，更要记录瞬间的灵感，以及不 懂的地方，不可小视!
这四本是你必不可少的，不过作为我们这些非英语专业的研究生来说，还有一个应该具 备的本子就是英语好句记录本。 二、论文写作要点
1、选题要小，开掘要深;不要题目很大，内容却很单薄。
2、写作前要读好书、翻阅大量资料、注意学术积累，在这个过程中，还要注重利用网络， 特别是一些专业数据库
3、“选题新、方法新、资料新”的三新原则(老板教导的) 4、“新题新做”和“小题大做 总之，一点之见即成文。
三、如何撰写实验研究论文(唐朝枢)
论文发表意识：基础研究成果的表达方式;是否急于发表(创新与严谨的关系);发表的 论文与学位论文的区别(反映科学事实而不是反映作者水平)
论文格式：原著、快报、简报、摘要。不同于教科书、讲义，更不同于工作总结。
撰写前的准备工作：复习和准备好相关文献;再次审定实验目的(学术思想,Idea);实验资料 完整并再次审核 :
问题的提出;研究的现状及背景;以前工作基础;本工作的目的;思路(可提假说); 对象;方法;结果。在… 模型上，观察 … 指标， 以探讨 … (目的) 2. M & M
⑴ 材料的写法和意义; 伦理.
⑵ 程序与指标。操作程序：能序贯，可操作性;方法： 多指标方法的排序;引出参照 文献简述;改良之处;哪些详或简?⑶ 统计学处理 3. Results
⑴指标归类描述，忌流水帐。不分析不解释，但要体现思路 ⑵ 文字、图、表相对独立，但避免重复
⑶ 避免统计错误：对照，均衡，随即，重复。计量-计数、绝对值-相对值、专一指标 —综合指标的转换。盲判与非盲判。技术资料直接概率法与卡方检验;多组资料与两组资 料;等级相关与直线相关;多因素与单因素分析;配对资料与独立样本资料;非正态分布 资料;例数不当;平行管，混合样本;突出差异(绝对值， Δ值，变化%; 联合×、÷ 比值，分亚组等)有效位数的保留。统计学结论与专业结论。 4. Discussion
⑴ 背景材料：展开问题的提出;有关本研究的一些基本知识内容(不要离题太远)
⑵ 本实验结果分析：各指标的意义(与文献值比较)，结果说明什么问题 ⑶ 进一步对结果机理分析：结合文献
⑷ 本工作的意义、结语或小结，进一步提出的新问题 其它注意点：
① 引证讨论文献知识太多(不同于学位论文)，掩盖了本工作的贡献 ② 分析不合逻辑，结论不当 ③ 讨论太浮浅，文献知识不熟悉 ④ 写成工作总结，缺乏学术高度
⑤ 要正确使用缩写词，尤其是组别缩写词 5. 参考文献：为什么要引文献
⑴ 立论依据的文献：新,权威性文献，不用快报或摘要 ⑵ 自己工作的自引：工作连续性
⑶ 实验结果与文献资料比较：新，可用快报, 会议及个人咨询资料 ⑷ 方法学：经典文献,注意引文准确，不要转引 6. 摘要：
问题的提出(Background);本工作目的;对象;方法(指标，分组);主要结果(数 据，统计);结论与展望
7.再推敲文章题目：不切题，过大、过小
8.投稿：按杂志稿约修定(留底).引用该杂志文章.忌一稿两投
9.致命伤:目的不明确;重复性工作无创新;方法学问题致结果不可信.临床研究:伦理;病 例和对照选择;临床关系充分分析
四、如何写好论文讨论部分：科学论文的讨论需要结构化
建议科学论文讨论部分使用的结构：陈述主要发现，本研究的长处和短处、同其它研究比 较的长处和短处;特别要讨论结果中的差别、研究的意义、未解答的问题及今后的研究方 向
讨论一开始要重新说明主要发现，用一个句子表示较为理想。接着全面说明本研究的长处 和短处，两者不可偏废。实际上，编辑和读者最注意研究的短处，这是所有医学研究不可 避免的。编辑和读者一旦发现研究的短处，而作者未加讨论，他们对文章的信任会发生动 摇，心生疑窦：是否还有他们和作者都未发现的其它弱点呢?
其次，将该研究与以前的工作联系起来，不炫耀自己的工作比以前的工作如何好，而 是比较其优劣。与其它研究进行对照，切忌将自己的缺陷掩盖起来。重要的是应该讨论为 什么会得出不同于别人的结论，作者可以放开去推测;但是如果弄不清自己的研究结果为 什么与别人的结果有差别，就不便作这种推测，也不该断言自已的研究结果正确，而别人 的错误。
接着应该讨论自己的研究“表明”什么，如何解释自己的研究发现，以及对临床医生 或决策者有什么意义?此刻，作者的境地是危险的，多数编辑和读者能够理解作者的谨慎 ，不逾实证界限。由读者自己去判断研究的意义：他们是会做到的。作者甚至可以指出研 究结果证明不了什么，防止读者得出过度、不实的结论。最后，应点明哪些问题尚未解答 ，以及要继续做的工作。显然，编辑和读者不喜欢夸大的作法。事实上，作者对论文的这 一部分常常写得乱糟糟的。虽然无法阻止作者写一篇充满推测的文章，但切不可因推测而 毁了证据。
讨论部分有时也许需要别的小标题，但我们以为，现在提出的结构适合大多数研究论 文。尽管统一结构有难度，甚至受限制，我们相信这种结构会降低总的文字长度，防止不 恰当的推测和重复，减少报道偏差，提高报道的总体质量。这种设想是完全经得起检验的
。我们欢迎BMJ的作者和读者发表观点，如果反映好，我们将使用结构式讨论。 五、关于写英文文章的秘诀
我老板平均每个毕业的博士都有6篇以上的SCI，他从来不强求学生发文章，只教如何 做研究。下面的问题，他只和我说过一次，之后我的行动与之不相符就会被骂。现在成了 习惯来这样思考，做事，发现真是事半功倍。
1. 你在做研究之前，想过结果能不能发表没有?往哪里发?
2. 写文章的高手是先把文章大框写好，空出数据来，等做完实验，填完空就可以发了。正 谓心中有沟壑。
3. 在想不清楚要写什么，要发到哪里去，自己做的与同行做的有什么出色之处，之前，就 不要动手做事。去看文献，去想。想不清楚就做，不如不做
要想这样子做，就得先看文献不是?要知道如何把文章架起来，要知道别人是如何讨论 的，要知道你自己的数据是不是说明了与别人不一样的东东或别人没有做过。这个过程就 是看文献，想的过程，这些搞清楚了，写就简单了。要是先做事，做完发现别人做过，或 无法用理论解释，岂不是冤大头? 六、写论文的技巧
优秀论文的要素：1、正确选题;2、合适的切入点;3、简洁明了;4、说清自己的贡献;
5、可靠的/可重现的结果;6、可重复的过程;7、好的.文章结构和逻辑流程;8、精选的参 考文献
优秀论文的误区：1、Idea越多越好;2、一味追求革命性的，突破性的成果;3、数学、理 论和公式越复杂越好——显示自己的聪明;4、追求最好，史无前例;5、显示权威性，引 文中大量引用自己的论文。
写文章的条件：1、与研究工作相关，确实有了好的想法，不是为了写而写;2、取得了有 价值的成果，对学术界有贡献;3、实验成熟，经得起检验;4、已经需要记录下来和其他 人分享
写论文的要点：1、写出3~4层的纲要反复修改多次。2、从Introduction开写，回顾已有的 工作。3、要声明文章结构，不要直接进入细节。4、声明工作的动机和基本原理，提出潜 在的问题，自己进行回答。5、讲明自己工作与前人的不同，说明自己的贡献及其实际应用 前景。6、最后写Summary和Abstract，反复斟酌后确定标题。
Reviewer Check List: 1、论文是否提出了一个新的问题或者给出了已有问题的一个新的 解决方案。2、论文的主要结果是什么?3、实验结果是否充分?4、论文技术含量如何?
5、论文是否对所提出的技术/结果的有效性和局限性进行了评价?6、论文写作是否清晰， 从而令本行业内多数研究人员可读?7、论文是否适当地引用和介绍了与之相关的历史文献 ?8、论文是否应该给予嘉奖?
IEEE Transactions on CSVT Review form: 1、在多大的程度上满足本期刊读者的兴趣?
2、论文所使用的方法的评价?3、结果是否具有新颖性?4、主要结果是否正确?5、论述 是否清晰?6、是否具有一致性(前/后，论述/结果)?7、引文是否充足?8、Reviewer的 意见：(Accept / Accept after a minor revision / Reject / Reject but resubmit a fter a major revision / Submit to another journal)。 七、论文写作技巧：
1、宣传自己——说明论文的重要性。流程：a)问题X是重要的;b)前人的工作A、B曾经 研究过这个问题;c)A、B有一些缺陷;d)我们提出了方法D;e)对D进行实验，和A、B进
行比较;f)实验证明D比A、B优越;g)解释为什么D是更优的，而其他的思路(比如E)是 不行的;h)阐述D的有效性和局限性;i)对D进一步发展的讨论。要点：j)简洁最重要; k)不犯粗心的错误，仔细验证结果和适当选择用词。
2、细心修改。步骤：a)30%的时间细心思考，70%的时间认真写作初稿;b)把写好的论文 放一段时间;c)逐字逐句地阅读论文;d)请其他人帮助阅读和修改;e)在修改的时候， 从别人的角度来审视论文(Reviewer / boss / colleagues / proof-reader);f)仔细 修改的次数 > 3;修改的总次数 > 5。要点：g)自己读自己的论文很乏味，并且不易找到 错误;h)为了论文的小的层次提升，要付出大量劳动。
3、优化英语。步骤：a)自顶向下地组织论文(大纲/逻辑/流程);b)用其他的优秀论文 (尤其是同期刊/同系列的论文，优秀书籍)作为范例;c)请别人帮满阅读和修改语法和 用词;d)记录自己用词和语法的错误，进行积累。要点：e)用词和语法固然重要，但是 结构和逻辑更加重要。 八、优秀论文结构范例：
1、Abstract—— 对自己工作及其贡献的总结：a)阐述问题;b)说明自己的解决方案和 结果。
2、Introduction——背景，以及文章的大纲：a)题X是重要的;b)前人的工作A、B曾经 研究过这个问题;c)A、B有一些缺陷;d)我们提出了方法D;e)D的基本特征，和A、B进 行比较;f)实验证明D比A、B优越;g)文章的基本结构，大纲。
3、Previous Work——说明自己与前人的不同：a)将历史上前人的工作分成类别;b)对 每项重要的历史工作进行简短的回顾(一到几句)，注意要回顾正确，抓住要点，避免歧义 ;c)和自己提出的工作进行比较;d)不要忽略前人的重要工作，要公正评价前人的工作 ，不要过于苛刻;e)强调自己的工作和前人工作的不同，最好举出各自适用例子。 4、Our Work——描述自己的工作，可分成多个部分：a)从读者角度阐明定义和表示法; b)提供算法的伪码，图解和相应解释;c)用设问的方式回答读者可能提出的潜在问题; d)复杂的冗长的证明和细节可以放在附录中，这里关键是把问题阐述清楚;e)特例和例 外应该在脚注中给予说明。
5、Experiments——验证提出的方法和思路：a)合理地设计实验(简洁的实验和详尽的实 验步骤);b)必要的比较，突出科学性;c)讨论，说明结果的意义;d)给出结论。 6、Conclusion——总结、前景及结文：a)快速简短的总结;b)未来工作的展望;c)结 束全文。
7、References——对相关重要背景文献的全面引用：a)选择引文(众所周知的结论不必 引用，其他人的工作要引用);b)与前文保持一致。 8、Others——致谢、附录、脚注。
处理被拒：1、理解被国际权威期刊拒稿是一件正常的事情(70%以上被拒)，保持良好心态 。
2、感谢编辑和Reviewer的意见和工作。3、询问副主编，自己可以怎样处理这篇论文最合 适(重投/改投/撤回)。4、继续新的研究或补充修改后改投其他杂志。
常见问题：1、是否可以一稿多投?千万不要!但是一篇会议论文经过修改以后可以再投期 刊。2、是否可以建议副主编如何处理自己的论文呢?不行，但可建议他别让某人评阅。3 、如4月都未收到副主编回复怎么办?写一封友好的询问信，别催得太紧，别找主编。4、 如和副主编意见严重不和怎么办?可以找主编，但是别经常这样做。5、如果和主编的最终 决定严重不和怎么办?没有办法了