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中国细胞杂志论文参考文献

发布时间:2024-07-04 07:29:46

中国细胞杂志论文参考文献

细胞工程论文

细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。下面是我为大家整理的细胞工程论文,欢迎阅读。

【摘要】 目的制作去细胞肌肉组织工程支架,并检测其与人羊膜上皮细胞的生物相容性。方法 采用TNT和十二烷基磺酸钠结合的化学萃取方法制作去细胞肌肉组织工程支架,冰冻切片观察其结构。将人羊膜上皮细胞种入支架培养7 d后,用免疫组化检测羊膜上皮细胞的增殖活性、NT3及BDNF的表达,扫描电子显微镜观察其超微结构。结果 支架中细胞去除完全,其主要结构为平行排列的管状结构。细胞外基质的主要成分弹性纤维和胶原纤维保持完好。羊膜上皮细胞在支架里有增殖活性,并呈现NT3、BDNF免疫反应阳性。扫描电镜显示,羊膜上皮细胞在支架中分布均匀,生长良好。结论 成功的制作了去细胞肌肉组织工程支架,其与人羊膜上皮细胞有良好的相容性。

【关键词】 去细胞肌肉;人羊膜上皮细胞;生物相容性

近年来组织工程研究的重要进展之一就是采用自体或异体移植物制作天然生物降解材料的组织工程支架。其中去细胞移植物与机体有良好的生物相容性。去细胞肌肉支架可作为生物工程支架支持神经细胞轴突再生。Mligiliche等〔1〕把去细胞肌肉移植入大鼠坐骨神经缺损处,4 w后发现有大量神经轴突长入去细胞肌肉支架中。由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限,去细胞肌肉支架要发挥更大的作用往往需要向支架中植入种子细胞〔2,3〕。研究表明羊膜上皮细胞可分泌多种神经因子〔4,5〕,促进神经元轴突的生长,是一种良好的治疗神经系统疾病的种子细胞。本研究利用化学去细胞的方法制成去细胞肌肉支架,并把羊膜上皮细胞种入去细胞肌肉支架内,探究两者的相容性,为开展组织工程治疗神经系统方面的疾病提供新的途径。

1 材料与方法

材料

实验动物 Wistar 大鼠由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供。

试剂 IMDM培养基及小牛血清由Hyclone 公司提供。5′溴尿嘧啶核苷(BrdU) 及BrdU 单克隆抗体购自Neomarker公司;神经营养素(NT)3,脑源性神经营养因子(BDNF)兔抗人多克隆抗体购自武汉博士德公司,SABC免疫组化试剂盒购自福州迈新生物公司。人羊膜上皮细胞株为本实验室保存。

方法

去细胞肌肉支架的制备 参考 Brown等〔6〕去细胞膀胱的制作方法制备去细胞肌肉支架,简述如下:取Wistar大鼠腹锯肌,放入蒸馏水中,在摇床中以37℃、50 r/min摇48 h后,转入3%的TritonX100溶液,摇床中37℃、50 r/min摇48 h。然后放入蒸馏水中,摇床37℃、50 r/min摇48 h。换成1% SDS溶液,摇床37℃,50 r/min摇48 h。PBS洗24 h。PBS中4℃保存备用。

支架形态结构的观察及成分鉴定 肉眼观察去细胞肌肉的形态。去细胞肌肉用4%多聚甲醛PBS固定1 h,5%蔗糖90 min,15%蔗糖90 min,30%蔗糖过夜以梯度脱水,OCT包埋,冷丙酮速冻,之后放入-70℃冰箱保存。恒冷箱切片机切片,HE 染色,观察其内部结构。此外对切片进行Van Gienson(VG)染色和 Weigert染色(VG+ET染色)检测支架的细胞外基质成分。

人羊膜上皮细胞的培养 人羊膜上皮细胞在DMEM培养液中(含10%胎牛血清,100 U/ml青霉素,100 mg/ml链霉素,200 μg/ml的谷氨酰胺),37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养,隔天换液,待单层培养细胞生长至80%汇合后,传代培养。

人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架相容性的鉴定

取生长良好的人羊膜上皮细胞,80%细胞接近融合,弃去培养液,胰蛋白酶消化,当胞体回缩,细胞间隙变宽时,用血清终止消化,反复轻吹瓶壁细胞,制成单细胞悬液于离心管中,1 000 r/min,离心3 min。用DMEM重悬细胞。用1 ml注射器吸入细胞悬液,以2×106/ml 密度注入去细胞肌肉支架中分装至24孔板中,在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养,隔天换液,培养1 w。掺入Brdu(终浓度为10 mg/L),继续培养1 d后,恒冷箱切片机切片(方法同前)。切片经PBS 洗后,3% H2O2灭活内源性过氧化物酶10 min,血清封闭20 min;一抗用BrdU(1∶1 000稀释)单克隆抗体,BDNF和NT3多克隆抗体(1∶100稀释)4℃孵育过夜,PBS 洗后,二抗37℃孵育30 min,PBS 洗后,SABC37℃孵育30 min,DAB显色。光镜下观察。

扫描电子显微镜鉴定羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架上的生长情况 取生长良好的人羊膜上皮细胞,80%细胞接近融合时,用上述方法消化下来后,把羊膜上皮细胞种植到去细胞肌肉支架中,放在24孔板中,在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养7 d后,用2%戊二醛固定后,梯度乙醇脱水,CO2临界点干燥,镀膜,采用扫描电子显微镜观察并拍照。

2 结 果

支架的组织结构与成分 去细胞肌肉外观呈乳白色,半透明,质地柔软。从大体上看,肌肉去细胞前后整体大小与形状无显著变化。支架纵切面的HE染色观察可见骨骼肌细胞成分消失,而纤维网架结构保持完整,支架内主要为平行管道。VG+ET染色证明支架成分主要为胶原纤维和弹力纤维等细胞外基质成分,胶原纤维为红色波浪状结构,弹性纤维为蓝色丝状结构,见图1。

羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架的兼容性 见图2,HE染色显示人羊膜上皮细胞在支架中生长良好,分布均匀(图

图1 去细胞肌肉支架大体与组织切片染色

图2 去细胞肌肉支架的病理图片2A)。免疫组化染色显示,BrdU阳性细胞数目多,提示支架中的人羊膜上皮细胞有增殖能力(图2B)。抗NT3和BDNF染色显示,支架中的人羊膜上皮细胞含有NT3、BDNF阳性颗粒,呈棕褐色分布在细胞质中(图2C,2D)。JSM5600LV扫描电子显微镜显示,在支架内部分布有大量细胞,细胞在支架中分布比较均匀,生长状态良好(图2E)。

3 讨 论

理想的支架材料应与细胞外基质类似,与活体细胞有良好的生物相容性〔7,8〕。去细胞肌肉作为治疗神经损伤的生物工程支架材料有如下优势:(1)去细胞肌肉的细胞外基质成分对组织细胞的'迁移、黏附、生长代谢都有重要作用,研究表明再生的轴突可以很好的黏附在去细胞肌肉支架上〔9〕。(2)去细胞肌肉的排列结构与神经膜管类似,仅在直径上略大于神经膜管〔10〕,它们提供了轴突可生长穿过的足够空间〔9〕,该结构对于诱导神经轴突再生是十分重要的。 Fansa等比较了接种施万细胞的不同去细胞生物材料(肌肉,静脉,神经外膜)桥接缺损的外周神经的结果,发现缺乏神经膜管样结构的去细胞肌肉支架(静脉和神经外膜支架)中的再生轴突是无序和排列混乱的,而有神经膜管样结构的去细胞肌肉支架中的再生轴突是有序排列的〔11〕。这种轴突再生的有序性对神经损伤的轴突再生同样也是十分重要的。(3)去细胞肌肉引起的免疫排斥反应较小〔9,12〕。这些优势都说明去细胞肌肉可作为治疗神经损伤的理想的材料。本研究采用的制作去细胞肌肉的方法主要用来减少异种移植材料的免疫排斥反应。该方法能有效的去除脂膜和膜相关抗原以及可溶性蛋白,并能有效的保留细胞外基质成分的原始空间结构。肌细胞正常呈平行分布,其细胞外基质成分也是平行分布的,从支架纵切面的结果看支架的纤维成分也是平行排布的,VG+ET染色结果显示细胞外基质的主要成分胶原纤维和弹性纤维保持完好。这些结果进一步证实此方法可成功制备去细胞肌肉支架。

由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限〔13〕,去细胞肌肉的生物相容性也有待验证。本研究用人羊膜上皮细胞作为种子细胞种入去细胞肌肉支架以探讨其相容性。研究表明,羊膜上皮细胞中含有多种生物活性因子,包括黏蛋白、转移生长因子、前列腺素E、表皮生长因子样物质,IL1,IL8 等因子,另外,还可分泌BDNF和NT3等重要的神经营养因子〔4〕。其中层黏蛋白、BDNF和NT3等生物活性因子对神经损伤的治疗具有十分重要的作用。羊膜上皮细胞可作为一种较理想的种子细胞,与去细胞肌肉支架结合可能成为治疗神经系统疾病的一个理想的组织工程材料。本实验观察到人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中分布均匀,抗BrdU、BDNF及NT3免疫组化显示去细胞肌肉支架中羊膜上皮细胞有良好的增殖能力,并能表达BDNF和NT3,说明羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中保持了良好的生物学活性。以上结果一方面证明了本研究制作的去细胞肌肉支架有良好的生物相容性,另一方面为应用羊膜上皮细胞和去细胞肌肉支架结合治疗神经系统疾病提供了理论和实验基础。

总之 ,本研究成功制备了去细胞肌肉支架,并证实人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中能分泌重要的神经营养因子,人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体为神经缺损再生提供了基底膜、神经营养因子等种种有利因素,构成了良好的神经再生微环境,有利于使神经缺损得到较好地修复,为进一步研究羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体治疗神经损伤奠定了一定的实验基础。

【参考文献】

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参考文献可以在百度学术中找到。 资料可以在万方、维普、CNKI找到。 数据资料可以在百度文库、中国统计年鉴中找到。参考文献规范格式 一、参考文献的类型参考文献(即引文出处)的类型以单字母方式标识,具体如下:M——专著 C——论文集 N——报纸文章J——期刊文章 D——学位论文 R——报告对于不属于上述的文献类型,采用字母“Z”标识。对于英文参考文献,还应注意以下两点:①作者姓名采用“姓在前名在后”原则,具体格式是: 姓,名字的首字母. 如: Malcolm Richard Cowley 应为:Cowley, .,如果有两位作者,第一位作者方式不变,&之后第二位作者名字的首字母放在前面,姓放在后面,如:Frank Norris 与Irving Gordon应为:Norris, F. & .;②书名、报刊名使用斜体字,如:Mastering English Literature,English Weekly。二、参考文献的格式及举例1.期刊类【格式】[序号]作者.篇名[J].刊名,出版年份,卷号(期号):起止页码.【举例】[1] 王海粟.浅议会计信息披露模式[J].财政研究,2004,21(1):56-58.[2] 夏鲁惠.高等学校毕业论文教学情况调研报告[J].高等理科教育,2004(1):46-52.[3] Heider, . The structure of color space in naming and memory of two languages [J]. Foreign Language Teaching and Research, 1999, (3): 62 – .专著类【格式】[序号]作者.书名[M].出版地:出版社,出版年份:起止页码.【举例】[4] 葛家澍,林志军.现代西方财务会计理论[M].厦门:厦门大学出版社,2001:42.[5] Gill, R. Mastering English Literature [M]. London: Macmillan, 1985: .报纸类【格式】[序号]作者.篇名[N].报纸名,出版日期(版次).【举例】[6] 李大伦.经济全球化的重要性[N]. 光明日报,1998-12-27(3).[7] French, W. Between Silences: A Voice from China[N]. Atlantic Weekly, 1987-8-15(33).4.论文集【格式】[序号]作者.篇名[C].出版地:出版者,出版年份:起始页码.【举例】[8] 伍蠡甫.西方文论选[C]. 上海:上海译文出版社,1979:12-17.[9] Spivak,G. “Can the Subaltern Speak?”[A]. In & L. Grossberg(eds.). Victory in Limbo: Imigism [C]. Urbana: University of Illinois Press, 1988, .[10] Almarza, . Student foreign language teacher’s knowledge growth [A]. In and (eds.). Teacher Learning in Language Teaching [C]. New York: Cambridge University Press. 1996. .学位论文【格式】[序号]作者.篇名[D].出版地:保存者,出版年份:起始页码.【举例】[11] 张筑生.微分半动力系统的不变集[D].北京:北京大学数学系数学研究所, 1983:.研究报告【格式】[序号]作者.篇名[R].出版地:出版者,出版年份:起始页码.【举例】[12] 冯西桥.核反应堆压力管道与压力容器的LBB分析[R].北京:清华大学核能技术设计研究院, 1997:.条例【格式】[序号]颁布单位.条例名称.发布日期【举例】[15] 中华人民共和国科学技术委员会.科学技术期刊管理办法[Z].1991—06—058.译著【格式】[序号]原著作者. 书名[M].译者,译.出版地:出版社,出版年份:起止页码.三、注释注释是对论文正文中某一特定内容的进一步解释或补充说明。注释前面用圈码①、②、③等标识。四、参考文献参考文献与文中注(王小龙,2005)对应。标号在标点符号内。多个都需要标注出来,而不是1-6等等 ,并列写出来。 最后,引用毕业论文属于学位论文,如格式55.学位论文【格式】[序号]作者.篇名[D].出版地:保存者,出版年份:起始页码.【举例】[11] 张筑生.微分半动力系统的不变集[D].北京:北京大学数学系数学研究所, 1983:1-7.

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一、主要论文1. Li YJ, Chen YC, Tao Y, Wang Y, Chen YF, Xu WR. Fibronectin increases RhoA activity through inhibiting PKA in human gastric cancer cell line SGC-7901. Molecular Medicine Reports, 2011,4(1):65-69(SCI收录)2. Sun B, Geng S, Huang X, Zhu J, Liu S, Zhang Y, Ye J, Li Y, Wang J. Coleusin factor exerts cytotoxic activity by inducing G(0)/G(1) cell cycle arrest and apoptosis in human gastric cancer BGC-823 cells. Cancer Lett, 2011, 301(1):95-105(SCI收录)3. 王忠诚,李永金,陈永昌等.可溶性纤维连接蛋白对SGC-7901细胞中PKA活性的影响.中国细胞生物学学报.2011,33(5):492-497(通讯作者)4. 李永金,王忠诚,陈永昌.整合素与RhoA、蛋白激酶A在肿瘤迁移过程中的作用.中国细胞生物学学报.2010,32(6):. 李永金,姚红波,陶燕,陈永昌.阿司匹林经核因子-κB信号通路抑制胃癌细胞AGS生长.临床检验杂志, 2010,28(4):. 李永金,张鹤云,封云,陈素仙,张太平,陆任云,陈月芳,黄晓佳.猪脑提取物对Alzheimer病大鼠学习记忆的保护作用. 时珍国医国药,2010,21(7):. 姚红波,李永金,陶燕等.阿司匹林对胃癌细胞株SGC-7901增殖及核因子κB表达的影响. 江苏大学学报(医学版),2009,19(1):39-42(通讯作者)8. 姚红波,李永金,陈永昌.阿司匹林抑制结肠癌细胞的分子机制. 江苏大学学报(医学版),2008,18(1):85-88(通讯作者)9. 李永金, 陈永昌,王瑛,陶燕,许文荣.可溶性纤维连接蛋白可活化RhoA并引起癌细胞骨架相关改变(英文). 细胞生物学杂志,2007,29(2):.李永金. 医学多媒体课件制作与应用的经验和体会. 江苏大学学报高教研究版 2004,(26)3a:101-10311.李永金,顾振纶等.槲皮素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆影响及与海马细胞凋亡关系的研究. 中草药,2003,34(7):632-63512.李永金,顾振纶等. 槲皮素对Alzheimer病大鼠的脑保护作用及其机理研究. 中成药,2002,24(11):859-86213.李永金,陈素仙,李静,张崇高.布替萘芬霜剂局部给药对家兔慢性毒性实验研究. 江苏大学学报(医学版),2002,12(3):220-22214.李永金,顾振纶等.阿斯匹林对Alzheimer病大鼠学习记忆影响及其分子机制. 中国药理学通报,2000,16(05):570-57315.李永金,顾振纶等.阿尔茨海默病与细胞凋亡及其基因调控. 国外医学.老年医学分册,1998,19(4):169-172二、编写教材(1) 药理学.东南大学出版社 (副主编)(2) 新编医用护理药理学. 人民卫生出版社.(参编)(3) 药理学. 科学出版社 (参编)(4) 药理学. 人民军医出版社 (参编)(5) 生物医学机能实验与研究. 人民卫生出版社. (副主编)(6) 机能学实验教程. 苏州大学出版社。(第二主编)

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帕金森的危害如下:

危害一、患有帕金森的患者,在患病后会呈现肢体的震颤、行动的不便的等病症,由于这些病症,患者怕同事或朋友见笑,所以就不盲目将本人封锁起来,远离了原先熟习的生活、工作圈。整天待在家中。这样,疾病在停顿,病症在加重,心情也随之变得异常不好,很多帕金森患者存在不同水平的抑郁、焦虑病症。

危害二、疾病会招致患者心灵闭锁,远离社会。由于帕金森患者在患病期间会呈现肢体的震颤、行动的不便等病症,但是这些病症患者怕同事或朋友见笑,不盲目将本人封锁起来,远离了原先熟习的生活、工作圈。整天待在家中。这样,疾病在停顿,病症在加重,心情也随之变得异常不好,帕金森病的危害除了会使病情加重外,还会让很多帕金森患者患有不同水平的抑郁、焦虑症。

危害三、患有帕金森的患者随着病程时间的延长,所以患者的病情也就越来越重,而一旦病情加重就会使患者的家庭面临越来越繁重的人力和经济担负,病人从开端的偶然需求人照顾逐渐开展到需求一个以至两个特地的人来照顾病人的根本生活。

危害四、疾病会使患者的身体运动机能的逐步丧失,自身帕金森患者的病症是先从单侧发病,然后逐步涉及到对侧肢体,所以不少的患者一开端停止药物治疗还有一定的效果,越到后期效果也要不时的降低,并且反作用还越来越明显。到中晚期会影响到吞咽发声,晚上翻身艰难,失眠等,这些都是帕金森病的危害。严重的患者到晚期会由于肌肉挛缩、关节强直而卧床。

危害五、普通患有帕金森的患者,疾病的病症都是先从单侧开端发病的,然后病症就会逐步涉及到对侧肢体,药物治疗的效果也逐步降低,反作用越来越明显。到中晚期会影响到吞咽发声,晚上翻身艰难,失眠等。严重的患者到晚期会由于肌肉挛缩、关节强直而卧床。

危害六、会加重患者的家庭担负,普通帕金森病情的危害是随着患者病情的加重而加重的,只需患者的病情越重,那么患者的家庭将会面临越来越繁重的人力和经济担负,帕金森患者从开端的偶然需求人照顾逐渐开展到需求一个以至两个特地的人来照顾病人的根本生活。

补充帕金森的护理事项,如下图:

《中华放射医学与防护杂志》,是3核心期刊。是非常好的核心期刊。主办单位:中华医学会该刊被以下数据库收录:ca化学文摘(美)(2014)jst日本科学技术振兴机构数据库(日)(2013)中国科技论文统计源期刊(2015-2016年度)cscd中国科学引文数据库来源期刊(2015-2016年度)(含扩展版)北京大学《中文核心期刊要目总览》来源期刊:2014年版

中华细胞与干细胞杂志是3核心期刊。所以是单核

绍一下帕金森的危害。  1、常见的帕金森的危害是身体运动机能的逐渐丧失:帕金森患者症状一般先从单侧发病,然后逐渐波及到对侧肢体,药物治疗的效果也逐渐降低,副作用越来越明显。到中晚期会影响到吞咽发声,晚上翻身困难,失眠等。严重的患者到晚期会因为肌肉挛缩、关节强直而卧床。  2、心灵闭锁,远离社会是最常见的帕金森的危害。帕金森患者由于肢体的震颤、行动的不便,怕同事或朋友见笑,不自觉将自己封闭起来,远离了原先熟悉的生活、工作圈。终日待在家中。这样,疾病在进展,症状在加重,心情也随之变得异常不好,很多患者存在不同程度的抑郁、焦虑症状。  3、家庭负担逐渐加重:随着帕金森病人病情的加重,家庭将会面临越来越沉重的人力和经济负担,病人从开始的偶尔需要人照顾逐步发展到需要一个甚至两个专门的人来照顾病人的基本生活。通过上面的介绍,我想大家一定了解帕金森的危害了吧。既然了解了这些危害,那么大家就一定要做好帕金森的预防工作,在出现类似帕金森的症状的时候,一定要及时的检查,如果是帕金森的话,及时的治疗患者可以减轻很多痛苦,也让家庭的负担小了很多。

细胞杂志中文版

你是要中文的还是英文的?是要入门级别的还是更深一点的?给你列举一些:入门:中文:楼上说的《细胞生物学杂志》不错,综述比较多,但近年来刊物质量有所下降;在此推荐同样是中科院上海生科院的《生命的化学》,最适合大学高年级和刚进实验室的研究生。此外北京生物物理所的《生物化学与生物物理进展》也不错。这些高校图书馆或相关院系图书馆都有,或者去维普和中国期刊网都行(只要你在教育网)。英文:推荐综述类期刊,如“Trends in”系列,先从学会看review起,了解后再理解,因为一上来就去看比较专业的research paper不太现实,确认了这一点就好办了。深入:中文:说实话,中文的杂志实在没有什么可以推荐的,个人觉得实在不怎么样,我从研二起再也没有看过(得罪同行朋友请不要见怪),原来上海生科院的《生物化学与生物物理学报》不错,后来为了提高档次改成全英文的了。英文:大牛杂志Cell及其姊妹刊(包括Molecular Cell,Immunity,Cancer Cell等等),Nature及”baby nature“(包括Nature cell biology,Nature Immunology等等),Science。中牛杂志:Genes&Dev,J Exp Med, Lancert,JCell Biol,Embo J等等,一般这些杂志都是一年以外的全免费。小牛:大名鼎鼎的JBC,MBC,MCB,oncogene,J Cell Science等等不计其数。写这些杂志的全称太长了,你如果感兴趣可以发消息给我,我在给你慢慢解释其特点和网站。

可以在单位或邮局订半年或全年杂志;也可以检索期刊代号,或查到出版单位电话咨询,按他们提供的方式订购;直接去邮局,那里有专门负责这方面的部门,他们也会给你查的,通过邮局向出版单位订购某期等,可以给你邮到单位或家中的。

《Cells》,如果你买得到的话

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